時間：2023-02-27 11:14:55
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尊敬的各位評委、各位老師、親愛的同學們：
大家好！很高興和大家相聚在這個美麗的一天，也非常感謝大家給我這個上臺的機會，謝謝！我今天演講的題目是。
天平是衡量權利義務的信物；法槌是懲惡揚善的利器；法官是社會主義的保障；法律是天下之公器。
“法律，是由立法機關制定、頒布的強制各種行為的規律的總稱。”這是上對法律的解釋，但它對于我來說，那是太抽象太模糊了。是兒時的游戲讓我懂得了規則的制訂和遵守；是讓我接觸了真正的法律條文；是學校的普法教育讓我學到了許多法律常識，漸漸地我知道了學法，守法的重要性。
其實，法律無處不在，在社會、在學校，就在我身邊。
人們常說，家庭是我們的第一課堂，父母是我們的第一任老師。記得班里曾做過一次試驗。老師問：如果有人欺負你，你怎么辦？竟然有半數以上的同學回答：打他，跟他拼了。老師接著問：為什么？那些同學便說：“爸爸媽媽告訴我，人在社會上要厲害一些，不能受窩囊氣。”我慶幸，我沒有生活在那樣的家庭里，我慶幸，爸爸媽媽從沒用這樣不正確的思想教育我。但是，那些同齡人的話仍讓我震驚。大人們是怎樣言傳身教的啊！難怪因早戀而懷孕的少年犯劉美娜對著她的父親大聲指責道：“你成天在家看那些，你有什么資格管我！”家庭教育的影響，難道還不足以引以為戒嗎？
有一天，我到四中附近的一個商店買東西，看到一個初一模樣的學生也在，因為個子比較小。過了一會兒，來了幾個稍大點兒的學生，看到那個小個子學生，一起圍上去。其中一個長頭發的男生伸出一只手拍他的肩：“哎，小弟弟，請客吧！”那個學生看了他們一眼，露出害怕又為難的表情，好像有想：“如果我不請，他們一定會打我的，唉，好漢不吃眼前虧，還是乖一點吧！他不情愿的掏出錢給他們買了一大堆好吃的，然后那幾個大點兒的學生揚長而去。有第一回就有第二回，連續幾天，那幾個學生都在找那個小個子混吃混喝，把他當作取之不盡、用之不竭的錢包。我知道事情發展不妙，就把這事告訴給四中賈校長，最后經過各方努力，那個小個子終于脫離了他們的魔爪。
人們都說法律無情，難道法律真的無情嗎？有人說，東邊日出西邊雨，。某位女老師，在感情方面曾經與一位有婦之夫發生糾葛。某日再碰面時，倆人在街道上發生爭執，男方剝掉女方的衣服，當眾對其污辱。事發后，女老師多方討告，卻因證據不足，未曾受理。女老師備受精神壓力。最后，女老師想到了刑事訴訟，刑事法庭經過多方走訪，調查和取證，但仍未能拿出充分證據。后法官多次對男方進行教育，法律感化，最后男方當事人同意賠償一萬元。女老師才得以保護。從此看出，法律的終極目標是人性關懷，法外有情亦是法律應有之義。
雖然，法律公正、嚴明，但青少年的犯罪越來越多。我國未成年人的犯罪已成為全部刑事案件的10﹪，這是一個多么痛心的數據呀！
這樣的案例讓人觸目驚心！同樣也是皆是。某校的宿舍墻上掛著“星級文明宿舍”的牌子，然而馬某因被誣陷偷東西而被十多名同校學生打殘后至死的暴力事件就發生在這樣的屋檐下。16歲的媽媽在洗漱室里生子后，便將其子順樓拋下。12歲的趙某向一女童索要方便面遭拒絕后，便將她推入水池溺死。高一新生楊某，只因與另一名同學發生口角，就糾集校外兩名男子用棒子打傷該同學，而拿出3萬多元的醫藥費。事后他竟還無知的說：“是他先罵我的，難道我錯了嗎？” 無數事實說明自身的道德品質和法制觀念起著決定性的作用。
類似事件舉不勝舉，數不勝數。小至搶劫行兇，大到貪污受賄。哥兒們義氣，為了給同班同學出口氣，放學時與其他班同學大打出手。行兇冒險搶劫，最后斷送自己的一生；有的人放學后比武論高低，打得不是你死就是我活。一位，把自己打扮得花枝招展的，用自己的青春騙取錢財享樂……可悲的享受主義，拜金主義。社會上的一切污垢、陰暗，在不斷侵蝕著稚嫩的心靈，締造著一件件人生的慘劇。
法律對于我們學生來說，還只有模糊的印象，有時候違犯小車了還毫不知情。那些犯罪的人為什么犯了罪，罪在哪里都不知道，這是對小車的意識太小看了，所以走上違法的道路。 我們青少年更要對小車有強烈的激情國。首先要懂法、知法、守法，還要愛護法，多看一些小車方面的書籍道路，為自己的人生道路撐上一把健康的雨傘。而道德又是一雙手，推開封鎖在心里的窗；道德是一扇窗，窗外是美好的天空；道德是一片天空，它孕育著無數純潔的心靈。
在日常生活中處處都離不開法律和道德。對于我們青少年來說，我們不需要做這些大事，我們先要從小事做起，從一點一滴做起。在擁擠的公車上，我們讓一讓座位；在紅燈面前，我們停一停腳步；在道路兩旁，我們彎腰撿起一片廢紙；在家里，我們替父母分擔一些煩惱。這都是遵守法律和道德表現，如果我們每個人都做到的話，那么，中國就會變的更美好。現代社會交通發達了，車輛也很多，如果沒有法律是很難想象的，來往的車輛肯定要碰頭發生爆炸事故。所以，有交通規則，交通井然有序，來往的車輛通過綠燈行，穿梭有序，暢通無阻。交通很少出事。相反，如果沒有交通規則，人們不遵守交通規則，南來北往，東行西去的各做各的，各不相讓，汽車、自行車、小車及行人擠成一團，那么，誰也別想順利的通過。所以，有交通規則還是有好處，社會生活離不開法律。
我國有句古話“沒有規矩不成方圓”。就是說，無論做什么事都要有一個規矩否則就什么也做不成。對國家，對社會來說這規矩就是法。作為國家公民和社會成員，人人都要遵守法律，維護法律。我們小學生作為國家的小公民，社會的小主人，同樣應該學法、懂法、守法，以保護我們自己的權益，不損害他人和社會的利益。只有從小養成遵紀守法的好習慣長大后才能成為對社會有用的遵紀守法的好公民。
我們國家的希望，今天的青少年是明天的建設者。現在不僅要學好知識，練好身體，養成良好的習慣，也要樹立法律意識和養成良好德道德修養。懂法、知法、守法，法律是我們健康成長的保護神，也是做為一個小公民必須遵守的行為準則，我們每個人都要認真學法，做一個遵紀守法的好孩子。
小學科學教師開學演講稿一
金秋時節，丹桂飄香，經過一個愉快的暑假，今天，我們迎來了新的學年，美麗的校園因為你們的到來而更加充滿生機。
借此學年開學典禮之際，我代表全校老師，歡迎一年級的新同學加入我們叉干小學這個溫暖的大家庭，歡迎其他同學重返校園。
新學期，對于同學們來說，就像是你們手中剛剛拿到的新書一樣，散發著油墨的清香，嶄新嶄新的。雖然現在還不知道這本奇特的書里面講述什么神奇有趣的故事，但在那整潔的封面上，卻已經寫滿了我們老師對你們的祝福。為了幫助你們讀好這本神秘而又奇特的書，開學前，學校里的老師們一直在做著精心的準備。就像以往一樣，我們每一位老師都懷著巨大的企盼期待著你們健康地成長希望你們長得更高、變得更懂事。
叉干小學是我們共同的家，在這個家中，我們每位老師都有責任來共同管理好這個由四面八方趕來的你們所組成的特殊大家庭。一句富有哲理的名言說過：“愛是教育的前提，愛是教師的天職。”所以作為叉干小學的每位教師都會努力做到關心愛護每一位學生，在今后的工作中，我們會一如既往地把人民教師對學生的愛均勻地灑向每位學生的心田!努力做到愛與嚴的結合。對學生嚴格要求，以嚴導其行，以愛溫其心，不斷改進教學方法，力爭在新的學期里取得更大的成績。為建設一流的校風，一流的學風，一流的班風，作出努力。親愛的同學們，在這樣一個充滿朝氣的新學期里，希望你們與我們的學校共同成長進步，用我們的實際行動來證明吧!
最后祝愿同學們在新的學期里有新的目標、新的發展、新的收獲。最后，祝同學們學習進步，心想事成!謝謝!
小學科學教師開學演講稿二
老師們、同學們：
經過近三個星期的休整，大家又回到安靜的校園，雖然此時天氣還有點寒冷，但有3700多年輕的心一起跳動，學校頓時溫暖了起來。
上學期放假的時候，我與高三一位同學交談了一次，她的成績波動特別大，有時可能上一本，有時連二本都不能上，當我問起她對這次xx一調考試的自我評價時，她說感覺自己好失敗喲。她接著說，自己做了那么多題，每天都是好晚才睡覺，但最終才考了這個分數，真的很郁悶。
其實，我們每一個人都不希望自己的付出沒有收成，更不希望自己失敗。在我們的文化傳統中有一種英雄崇拜的情結，“成者為王，敗者為寇”，成功者，人們往往頂禮膜拜，我們都羨慕英雄。但是，我們自己為什么就不能成為英雄呢?如果不能成為別人的英雄，那我們為什么不成為自己的英雄?戰勝自己就是自己的英雄。只有成為自己的英雄才能最終成就人生，成為別人的英雄。
大家知道，XX年1月10日，國際足聯年度頒獎典禮在瑞士隆重舉行。在最具分量的fifa金球獎評選中，阿根廷球星梅西擊敗哈維和c羅，奪得XX年度fifa金球獎。算上XX年的世界足球先生(即fifa金球獎前身)和XX年“金球獎”稱號，梅西已經連續3年獲得這一稱號。然而，大家可能還沒有忘記，就在前不久，阿根廷意外的0：1輸給委內瑞拉，爆出世界杯美洲區開賽以來的最大冷門，這也是阿根廷隊歷史上首次輸給委內瑞拉。賽后，阿根廷國內開始對梅西進行大肆抨擊，甚至很多球迷認為梅西踢得太臭導致球隊輸球。對于這些批評，梅西表示球迷的這番言論讓自己很委屈。但是只要到了賽場，為球隊拼到最后一刻的依然是梅西，梅西有一顆永不言敗的心，他戰勝了自己，成為了自己的英雄，也成了別人的英雄。最終才有機會獲得連續3年的金球獎。還有加拿大唯一連任兩屆的讓.克雷蒂安，小時候的他，相貌丑陋，說話口吃，殘疾導致他左臉局部麻痹，嘴巴總是歪向一邊，還有一只耳朵失聰。
他為矯正自己的口吃，模仿古代一位有名的演說家，嘴里含著石子練習講話。他母親看到兒子的嘴巴被磨爛，特別心疼，而懂事的兒子卻說道：“每一只美麗的蝴蝶，都是自己沖出束縛它的繭才變成的，我要做一只美麗的蝴蝶!”1993年10月，他參加加拿大競選時提出“使國家和人民變成一只美麗蝴蝶”的口號，讓他以高票當選。1997年，他再次獲勝連任。他戰勝了自己，他成了自己的英雄，也最終成了別人的英雄!
霍金18歲考取牛津大學，21歲卻換上嚴重的萎縮性脊髓硬化癥，醫生說他最多能活兩年半，可他以頑強的毅力與病魔作斗爭，幾個兩年半過去了，他還堅強的活著。腳不行了，手不行了，嘴也不行了，他干什么都要別人或機器幫忙，但他仍舊沒有氣餒，他用他的大腦不斷努力，他是我們心中的英雄，但，他首先是自己的英雄。眼瞎的彌爾頓、耳聾的貝多芬、啞巴帕格尼尼又何嘗不是戰勝自己成為自己的英雄?
要想成為自己的英雄，必須要自信，必須要付出，必須要努力，必須要經受得了挫折，必須要有堅韌的毅力，必須要有一往無前的勇氣。同學們，一次考試的不利，一次小小的失利，老師或者家長的一次批評，同學的一句不恰當的話都不能承受，還何談成為英雄?在年輕人的詞典里永遠也不能有失敗。我喜歡孫楠演唱的那首《做自己的英雄》，我希望大家也能喜歡。“我不怕身上的痛/我眼中有淚光閃動
我不怕迎面的風/一步一步向著前方的夢
我喜歡平凡的面孔/我看到自己燦爛的笑容
我喜歡向天空吶喊/我知道我一定會與眾不同
做自己的英雄/在我心中有熱情涌動/我的舞臺我自己來掌控
做自己的英雄/當你們的雙手在我身后舞動/我一定會站在最高峰”
小學科學教師開學演講稿三
尊敬的老師們，親愛的同學們：
大家上午好!
踏著輕快地步伐，迎著燦爛的陽光，我們又回到了美麗的校園，開始了新學期的學習與生活。
回首過去的一學期，學校在主管部門的關心和支持下，全體師生同心協力，銳意進取，不斷進步，我們在校園建設、辦學質量、辦學特色等方面均有進步，得到了社會與家長的好評，教育教學、文藝等工作均取得了不俗的成績，這是我們全體師生不懈努力的結果，更是對我們全體教師辛勤耕耘的褒獎。在此，我向大家表示衷心的感謝和崇高的敬意!
回首過去的一學期，我們的教學成績各有千秋，比如：今年考上普通高中的學生人數由上年的28人上升到37人;七年級政治在***老師和***老師的努力下，平均分位列全市第一;七年級語文在***老師、***老師和***老師的努力下，平均分位列全市第三;七年級數學在***老師、***老師和***老師的努力下，平均分位列全市第三，其中183班的***同學考得了100分的滿分;七年級地理在***老師和***老師的努力下，平均分位列全市第三;八年級語文在***老師、***老師和許艷云老師的努力下，平均分位列全市第三。
過去一年的工作，離不開全體教職工的共同努力，離不開各位科任教師的辛苦工作，也離不開所有班主任的苦口婆心，更離不開全體同學們的努力。
同學們，學生時代，是人生的黃金時代，而起始年級又是我們成長階段的重要轉折點，“良好的開端是成功的一半”，因此成功地邁好這一步尤為重要。一寸光陰一寸金，寸金難買寸光陰。同學們要珍惜這美好時光，勤奮學習，莫等閑，白了少年頭，空悲切!
七年級的同學們，走進**中學，你就走進了團結和友愛，也走進了拼搏和奮斗。愿我們的每一位新同學，從開學的第一天起就百尺竿頭更進一步。我相信：經過你們堅持不懈的努力和奮斗，就一定能擁有最后的收獲和喜悅。
九年級的同學們，此時的你們，匯集了老師們更多的目光，傾注了家長更多的心血，你們將擔負著希望，開始最后的沖刺，人生能有幾回搏，這是你們人生的關鍵一搏。九年級的同學們，你們已經為實現你們的理想付出了寶貴的時間和心血，我希望你們在最關鍵的一年里，制定好計劃，明確目標、增強信心、虛心求教、刻苦學習，科學安排時間，堅持不懈地努力下去，跨進理想的學府!
八年級的同學們，更要珍惜每一天，從今天起，你們已經來到了知識高峰的半山腰。是再接再厲，勇攀高峰;還是心滿意足，畏難卻步;你們每一個人都會受到一次次的考驗。尤其是面對前進征途中的困難和挫折要經得起風吹浪打。“有信心的人，可以化渺小為偉大，化平庸為神奇”。愿你們都能做一個珍惜時間，再接再厲，勇攀高峰的人。要知道：奮力攀登，絕頂風光無限美;固步自封，前功盡棄徒傷悲。
新的學期，新的開始，帶來了新的挑戰，也孕育新的希望與憧憬，面對這一更為緊張和富有挑戰的學習與工作，我們每一位教師、學生都應站在新的起跑線上認真審視自己，以滿腔的熱情投入到新學年的工作與學習中去，為實現自身的目標而奮斗、拼搏!在此，我祝愿并相信我們每一位師生都能以自己的勤奮與智慧書寫新學年學習與工作的滿意答卷。
“潛龍在淵，蓄勢騰飛”——我們堅信：有著追求無限光榮與夢想的**中學的人必將迎來更加美好的明天。
有這么一句話：一個人從搖籃到墳墓，這過程時刻都離不開法律。沒錯，法律和我們每個人的工作于生活息息相關，無論是個人的衣食住行、還是生老病死，或是企業的生產運營、國家的政治經濟、社會生活，都離不開法律。從長遠和整體的角度來講，法律給整個社會帶來了毋庸置疑的益處。正如交通公益廣告中說的那樣：“沒有紅燈的制約，便沒有綠燈的暢通。”
法律是一部生活的百科全書，告訴我們處世之方、待人接物之法、安身立命之道。作為一個普通的公民，唯有知法才能守法，唯有讓守法成為一種習慣，社會才能更和諧，人生才能更平安！
法律首先應該被理解為是一個公約，一個關于人們在共同生活中如何進行合作、如何解決糾紛、如何建立秩序的社會公約，是一個規定公民可以做什么和不能做什么的社會公約。既然任何人都不得以任何理由廢法行事，那么，即使為了追求良好的目的，即使位高權重，也不能違反法律。
我們敬愛的是守法的典范。有一次，總理去開會，在路上，司機違反了交通規則，交警批評司機卻耽誤了總理開會的時間。同車去的干部想和交警交涉，總理嚴厲制止說：“這怎么行？交通規則是政府頒布的，政府總理應該帶頭遵守。總理不遵守，就是帶頭破壞制度”。直到交警放行，總理一行才離開。守法必先嚴于自律，這是一種行為操守，更是一種道德修養。
許衡是我國古代著名的理學家。宋元之際，世道紛亂，許衡外出，因天氣炎熱，口渴難忍。路邊恰有梨樹，行人都去摘梨，唯有許衡不摘。有人問“何不摘梨解渴？”他回答：“不是自己的梨，哪能去摘？”那人說：“世道這樣亂，管他是誰的梨呢。”許衡正色道：“梨雖無主，我心有主。”
我們國家多年的普法教育取得了累累碩果，原來很多對法律一無所知的人，如今都能運用法律來尋求一個說法，就像電影《秋菊打官司》里的秋菊一樣，普通人法律意識的覺醒當然值得欣喜，但讓守法成為一種習慣，確實還有相當漫長的道路要走。
講奉獻、有作為是黨員的責任擔當。“天行健，君子以自強不息”、“士不可以不弘毅，任重而道遠”、“為官避事平生恥”，高度概括了擔當精神。。當前，在國家各級機關中存在著不講責任擔的“為官不為”現象，由過去的“門難進”、“臉難看”、“事難辦”變成了現在的“門好進”、“臉好看”、“事不辦”消極不作為的懶政、怠政。
做合格黨員要帶頭講奉獻、有作為，牢固樹立核心意識、大局意識、責任意識、看齊意識，不辱使命。具體來說，講奉獻、有作為，必須要有全身心投入的精神、追求完美的“工匠精神”、廢寢忘食吃苦耐勞的奉獻精神。只有這樣，講奉獻、有作為在工作中能夠得到踐行和升華，心系黨、心系國家、心系群眾。
講奉獻、有作為，要做到敢吃虧、能吃苦、會吃氣。雷鋒無私奉獻，樂于吃虧，有人說他是“傻子”。他把幫助別人當作人生的最大快樂。其精神實質是敢“吃虧”。雷鋒的“傻”是一個心眼向著黨、向著國家、向著事業的“傻”，是不計較個人名利、不計較個人得失、不計較個人辛苦的“傻”，是以服務人民為最大幸福、幫助他人為最大快樂的“傻”，是把方便讓給別人、把辛苦留給自己的“傻”，是把有限的生命投入到無限的為人民服務之中的“傻”。這樣的“傻”，盡管有人譏笑、有人置疑，但卻是社會最需要的；樂于為人的“傻”，讓人信服，讓人敬佩，讓人尊重。樂于“吃虧”的人，就有人跟隨，就會有作為，人們也不會虧待他。
本學期推普活動以“迎世博盛會,展魅力漢語”為主題.大家知道,語言文字是人們的交際工具,是信息的載體.加強語言文字的規范化、標準化,對社會的發展,科技的進步與交流和文化水平的提高,都有重要的意義.我們偉大的祖國是由56個民族組成的大家庭,使用通用的語言文字,不僅是現代經濟、科技和社會發展的需要,不僅有利于促進地區間民族間的交流,有利于普及文化教育,發展科學技術,更促進著我國物質文明和精神文明建設的進程.
今天,我們身處的21世紀是高科技知識經濟時代,網絡信息在社會經濟和人民生活的地位越來越重要,如果沒有統一的語言文字,便會帶來許多不便,甚至直接影響信息的傳送.一個城市語言文字規范化程序,是衡量其文明程度的重要標志.sh要建成真正的國際大都市,要吸引和留住全國甚至世界各地的優秀人才,就必須營造一個能夠順暢交流的語言環境,培育各地人才對sh的認同感和歸屬感.sh要在明年代表中國舉辦一屆成功的世博會,為預計突破7000萬的參觀人群提供優良的語言服務,就必須增強全體市民的語言文字規范意識.但由于各方面的原因,我們有些人在一定的場合中還不習慣說普通話,漢字規范使用的整體水平較低,一些商店的招牌,所出售的貨品濫用繁體字,亂造簡體字,隨意寫錯別字,濫用網絡語匯.所以,我們一定要規范語言文字,積極推廣普通話,并從我做起.
為迎接世博盛會,近一步提升我校語言文字工作的整體水平,提高學生的語言文字應用能力,在本學期推普工作中,我校在認真貫徹《cn區第十二屆全國推普宣傳活動方案》精神的同時,結合我校創建學校課堂文化活動,將開展一系列活動:舉行一次主題升旗儀式,出一期專題黑板報,訂閱一份語言文字刊物,組織各班推普小報制作比賽,學魅漢用魅漢知識競賽,部分同學參加“迎世博,學雙語”普通話和英語口語能力考試,組織部分教師參加中華誦--中華經典誦讀活動.
學校是傳播文化的場所,是培養人才的基地,是精神文明建設的搖籃.校園的美,不是校園外表的漂亮,而是我們全體師生的精神狀態,最美的聲音應該是我們規范標準的普通話.說文明話,行文明路,是我們師生素質的體現.因此,我們每一位學生在校一定要堅持講普通話,寫規范字.
[關鍵詞] 柱前衍生反相高效液相色譜法；谷胱甘肽
[Abstract] Objective Establish a pre-column derivatization RP-HPLC with plasma glutathione （glutath ione, GSH） method.Method With tris-（2-carboxy lethy l）-phosphine （TCEP） as reductant,7-fluorbenzo-2-oxa-1 ,3-diazole-4-sulfonate （SBD-F） as a derivative agent, N-acetyl cysteine acid （N-ace tylcystine, NAC） as an internal standard, C8 column separation. Mobile phase was methanol - phosphate buffer, gradient elution, the excitation wavelength （λex） 380nm, emission wavelength （λem） 510nm, internal standard quantification standard curve. Conclusion This method is accurate, sensitive, rapid, specific, suitable for laboratory research and clinical practice GSH detection.
[Keywords] Pre-column derivatization RP-HPLC; Glutathione
1.材料和方法
1.1儀器與試劑：Ag ilent LC-1100高效液相色譜儀，附紫外檢測器和熒光檢測器；BOS-RYPERS IL-C8（150.0mm×4.6mm，5µm），保護柱及C18柱芯；GSH、Cys、CysGly、GSH、TCEP、N-乙酰半胱氨酸（N-acetlycysteine，NAC）、SBD-F。甲醇、EDTA?2K、磷酸二氫鉀、硼砂、氫氧化鈉、三氯乙酸、正磷酸等其他試劑均為國產分析純。
1.2色譜條件：流動相：A相：25mmol/L，pH3.0的磷酸鹽緩沖液；B相：甲醇；梯度洗脫程序：B相的體積變化分數為0～9min，5%～10%；9～10min，5%；柱溫：30℃；流速：1ml/min；激發波長（λex）：380nm，發射波長（λem）：510nm。
1.3樣品預處理與測定：還原：取標準溶液或血漿樣品60µl加入10µl內標（NAC）液（800µmol/L）、10µlTCEP（120g/L）和20µl磷酸鹽緩沖溶液（25mmol/L，pH7.4），（37.0±0.3） ℃水浴10min。蛋白沉淀：在還原后的溶液中加入90µl三氯乙酸（100g/L，含4mmol/LEDTA?2K），漩渦振蕩混勻，4℃13000r/min離心10min。取上清液用于衍生。衍生及測定：在50µlSBD-F（1g/L，用0.125mol/L，pH9.5硼酸鹽緩沖液配制，含4mmol/LEDTA?2K）中加入10µlNaOH溶液（1.5mmol/L），125µl硼酸鹽緩沖液（0.125mol/L，pH9.5）和60µl經處理后的樣品液，（70.0±0.5）℃水浴80min，立即置于碎冰上冷卻10min，取25µl進樣分析。
2.結果
2.1樣品預處理條件的確定
2.1.1衍生劑量的確定：選擇0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5g/L不同濃度SBD-F進行衍生化反應。結果表明，SBD-F濃度為0.8g/L時，衍生化反應基本完全，高于此濃度的各衍生物峰面積變化趨于穩定。選擇衍生劑的濃度為1g/L。
2.1.2衍生化時間的確定：固定其他條件，取同一濃度標準品混合液分別衍生0、15、30、45、60、75、90、100min。結果表明，在0～60min內GSH和其他硫醇物衍生物峰面積隨時間的延長而增加，60min后峰面積趨于穩定，反應基本完全。選擇衍生化時間為80min。
2.1.3衍生化溫度的確定：取同一濃度的混合標準溶液在25、37、50、60、70、80℃不同溫度下進行衍生化反應。結果表明，衍生化反應溫度對衍生物的產率有顯著影響，衍生物峰面積隨溫度的升高而增加，超過60℃趨于穩定。選擇衍生化溫度為70℃。
2.1.4還原劑量的確定：取健康正常人混合血漿，在40、60、80、100、120、180g/L不同TCEP濃度下進行還原反應。結果表明， GSH衍生物與內標峰面積比值隨TCEP的濃度增加而升高，120g/L時達到較高峰值。選擇TCEP的濃度為120g/L。
2.1.5還原時間的確定：取健康人混合血漿各進行5、10、15、30、45、60min還原反應。結果表明，37.0℃水浴10min，GSH等硫醇衍生物與內標峰面積比值達到最大，其后趨于穩定。確定還原時間為10min。
2.2方法學評價
2.2.1精密度：取健康人混合血漿，加入不同體積的標準品混合液。經“樣品預處理及測定”項下操作。日內重復測定5次，連續測定5d，見表1。結果表明本方法具有較好的精密度。
2.2.2回收率：對高、中、低不同濃度的血漿樣品進行加標回收試驗，相對回收率%=（血漿標準溶液濃度-未加標準液血漿濃度）/加入標準液濃度×100%。結果顯示，各物質在不同濃度下均獲得滿意的回收率，CV均小于4.5%。
2.2.3標準曲線及最低檢測限：配制一系列不同濃度的標準溶液。以標準品與內標峰面積之比對標準品的濃度繪制標準曲線，求得回歸方程。以3倍信噪比（S/N=3）時樣品濃度為最低檢測限，見表2。
2.2.4穩定性：本研究結果表明，SBD-GSH、SBD-Cys、SBD2CysGly、SBD2GSH置于冷藏條件下至少可穩定1d；光照情況下可降低衍生物的熒光強度，因而衍生樣品應避光保存。
【關鍵詞】散痰寧糖漿；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿
散痰寧糖漿是《衛生部藥品標準》中藥成方制劑第七冊收載的品種，處方為桔梗、遠志（制）、桑白皮、氯化銨、鹽酸麻黃堿、薄荷腦。[1]是臨床用于支氣管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病治療的常用藥品。但是標準中沒有對處方中的鹽酸麻黃堿進行含量測定，《中國藥典》2010年版一部對麻黃藥材用高效液相色譜法測定鹽酸麻黃堿的含量[2]，筆者參考該法測定散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量，結果專屬性強、耐用性好、精密度高，認為此法可以測定散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量。具體實驗方法如下：1儀器與試藥
SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色譜儀，UV762型雙光束紫外分光光度計，FA2004電子分析天平。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。2檢測波長
取鹽酸麻黃堿對照品的甲醇溶液，在200-600nm波長處進行掃描測定，最大吸收波長為207nm，所以選擇檢測波長為207nm。3測定條件
以乙腈0.1%磷酸溶液（9：87）為流動相，色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流速為1.0ml/min，柱溫為23℃。4專屬性考察
取缺鹽酸麻黃堿的全處方量的陰性樣品，按上述的含量測定方法進行測定，陰性無干擾。5供試溶液的制備
5.1對照品溶液的制備精密稱取置五氧化二磷干燥器中減壓干燥12小時的鹽酸麻黃堿對照品9.9mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含鹽酸麻黃堿7.92μg）。
5.2提取溶劑的考察精密量取樣品（批號100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加50%甲醇、甲醇、乙醇各40ml，超聲處理20分鐘，分別加50%甲醇、甲醇、乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果以甲醇為提取溶劑，提取效率優于50%甲醇、乙醇，因此選用甲醇為提取溶劑。
5.3提取方法的考察精密量取樣品（批號100901）10ml，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，一份超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘；另一份置水浴中加熱回流20分鐘，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，精密量取續濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果兩種方法提取含量測定結果幾無差異，因此以上選用方便簡單的超聲處理進行提取。
5.4提取時間的考察精密量取樣品（批號100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加入甲醇各40ml，分別超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘、30分鐘、40分鐘，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，再精密量取續濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果幾種提取時間均能較完全提取，含量測定的結果幾無差異，因此提取時間選擇為20分鐘。
綜上所述，供試品溶液的制備方法為：精密量取樣品10ml，置50ml量瓶中，加入甲醇40ml，超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，精密量取續濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。6耐用性試驗
6.1穩定性試驗精密量取樣品（批號100901）10ml，按以上擬定的供試液的制備方法制備，室溫下保存，取對照品溶液及供試品溶液分別于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時、10小時，按以上擬定的含量測定方法，分別進樣10μl，并以含量計算其RSD值，結果為0.22，可見對照品溶液與供試品溶液在配制后10小時內測定，結果穩定。
6.2不同比例的流動相實驗曾以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）、乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）、乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85）為流動相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱（5μm，4.6×250mm）為分析柱，柱溫22℃，進行試驗研究，均能達到滿意的分離，測定結果分別為0.504、0.508、0.509，RSD為0.39%。
6.3不同的色譜分析柱實驗曾用ZIVCHROMI柱（5μm，4.6×150mm）、SHIMADZU C18柱（5μm，4.6×250mm）與Kromsil C18柱（5μm，4.6×150mm）為分析柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）為流動相，測定結果分別為0.505、0.509、0.510，RSD為0.39%。
綜合以上試驗，該方法的耐用性較好。
流動相的比例略作變化，鹽酸麻黃堿與其他組分均能達到基線分離，系統適應性較好。分別用ZIVCHROMI、SHIMADZU和Kromsil三種品牌的十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，鹽酸麻黃堿與其他組分均能達到基線分離，系統適應性好。7含量測定方法學研究
7.1標準曲線與線性范圍精密稱取鹽酸麻黃堿對照品11.98mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取該溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。每1ml含鹽酸麻黃堿分別為2.396ug、7.188ug、11.980ug、16.772ug、21.564ug，作為供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液各10μl，按以上色譜條件進行分析，測定峰面積，結果鹽酸麻黃堿濃度在2.396-21.564μg/ml范圍內與峰面積呈很好的線性關系，回歸方程及相關系數：A=5075872C-7919，γ=0.9997（C為鹽酸麻黃堿濃度，單位μg/ml，A為峰面積）。
7.2重復性試驗按以上擬定的含量測定方法，取樣品（批號為100901）共6份，精密量取10ml，分別制備供試品溶液，按上述色譜條件測定，結果RSD=0.59%，表明重復性良好。
7.3精密度從同一瓶散痰寧糖漿樣品（批號100901）中，同時取樣5份，按以上擬定的方法，分別制備樣品供試液測定。結果各樣含量的RSD為0.75%，表明精密度較好。
7.4加樣回收率試驗分別精密量取批號為100901（已知含量為0.5102mg/ml）的樣品5ml，置6個100ml的量瓶中，再分別精密加入鹽酸麻黃堿對照品溶液（濃度為3.7568mg/ml）各1.0ml，按以上擬定的供試品溶液制備方法和色譜條件，制備加樣回收供試品溶液，并精密量取10μl，注入高效液相色譜儀中，測定含量，計算回收率，結果回收率在96.88%-101.89%之間，加樣回收良好。
注：限于版面，數據及圖表略。
參考文獻
【摘要】 目的 建立測定人血漿中依諾沙星濃度的高效液相色譜方法。方法 血漿樣品經甲醇沉淀蛋白后，以乙腈∶0.05mol/L檸檬酸緩沖液(15∶85，pH3.5)為流動相，經HypersilBDS C18(4.6mm×150mm，5μm)色譜柱分離，345nm波長檢測。結果 依諾沙星在0.05～5.0μg/ml濃度范圍內線性關系良好，低、中、高三個濃度的提取回收率為44.8%～51.1%，日內、日間相對標準差為3.15%～6.61%。結論 本方法準確、快速，可滿足臨床藥動學研究的要求。
【關鍵詞】 依諾沙星 高效液相色譜法 藥動學
Determination of enoxacin in human plasma by
ABSTRACT Objective An HPLC method was established for determination of enoxacin in human serum. Methods Serum protein was precipitated with methanol. The analysis was conducted with a HypersilBDS C18 (4.6 mm×150 mm， 5μm) column， acetonitrile∶0.05 mol/L citric buffer (15∶85， pH3.5) as mobile phase， and the detecting wavelengh was at 345 nm. Results The linear range enoxacin was 0.05～5.0 μg/ml and the recoveries were in the range of 44.8%～51.1% at three different concentrations. The RSD of intra and interday were in the range of 3.15%～6.61%. Conclusion This method is suitable for the pharmacokinetic study of enoxacin.
KEY WORDS Enoxacin; HPLC; Pharmacokinetics
依諾沙星又名氟啶酸，是第三代喹諾酮類廣譜抗生素，通過作用于細菌DNA螺旋酶，抑制細菌DNA的合成和復制而導致細菌死亡。臨床上用于敏感菌所致的急性呼吸系統、泌尿系統、消化道及皮膚軟組織等感染的治療［1］。有關依諾沙星濃度測定的方法國內、外都有報道，有采用LC/MS/MS法［2］、熒光法［3］、微生物法［4］、微透析法［5］，常用HPLC紫外檢測［6，7］。本文建立了測定血漿中依諾沙星的高效液相色譜法，該方法簡便，快捷，并研究了該藥的體內藥動學行為，為臨床研究提供方法和依據。
1 儀器與試藥
HP1100系列高效液相色譜儀(Agilent公司)，GL20GII高速冷凍離心機(上海安亭科學儀器廠)。依諾沙星對照品(含量99.7%，山東羅欣藥業股份有限公司提供)；依諾沙星片(山東新華制藥股份有限產品，規格為每片200mg，批號0501084)。甲硝唑對照品(內標物，中國藥品生物制品檢定所)；乙腈、甲醇為色譜純；檸檬酸和三乙胺均為分析純。空白血漿由中國醫科大學附屬二院輸血科提供。
2 方法與結果
2.1 色譜條件
色譜柱為HypersilBDS C18柱(4.6mm×150mm，5μm)；流動相為乙腈∶檸檬酸緩沖液(15∶85，pH3.5)(緩沖鹽為每1000ml溶液加三乙胺6ml調至pH3.5)；流速1.0ml/min；檢測波長345nm；柱溫30℃。
2.2 血漿樣品處理
取血漿樣品0.5ml，于具塞塑料離心管中，補加50μl甲醇，加入內標(10μg/ml甲硝唑甲醇溶液)50μl，加甲醇1.0ml渦旋混合1min，10000r/min離心10min，移取上清液于另一潔凈試管中，55℃氮氣吹干上清，200μl甲醇溶解殘渣，取20μl上清液進樣，記錄色譜圖。
2.3 標準曲線
取0.5ml空白血漿，依次加入濃度為0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0μg/ml的依諾沙星標準系列的甲醇溶液50μl，配制相當于0.05、0.10、0.25、0.50、1.0、2.5和5.0μg/ml的血漿樣品，按“2.2”項下的方法操作，制備標準曲線。以待測物濃度C為橫坐標，待測物與內標物的峰面積比(Y)為縱坐標，用加權最小二乘法進行回歸運算，得直線回歸方程：
Y=0.8612C-0.00047 r=0.9977(n=3)
2.4 方法專屬性考察
在上述色譜條件下測得空白血漿、空白血漿加入標準品及實測血漿樣品的譜圖(Fig.1)。在本實驗條件下依諾沙星的保留時間約為3.05min，內標甲硝唑保留時間約為4.48min，血漿內源性物質對依諾沙星及甲硝唑無干擾。
2.5 方法精密度和回收率
制備濃度分別為0.1、0.5和2.5μg/ml的依諾沙星標準血漿樣品作為質控(QC)樣品，按“2.2”項下依法操作，每個濃度6個樣本，連續測定3d，以當日的標準曲線計算樣品的測得濃度，與配制的濃度對照，求得本法的精密度與準確度。另取相當于0.1、0.5和2.5μg/ml的標準品稀釋液，進樣20μl，記錄峰面積，考察提取回收率。結果見Tab.1。
2.6 穩定性考察
按“2.5”項下方法分別配制低、中、高三個濃度QC樣品，每個濃度進行6樣本分析經提取，室溫放置24h測定，結果RSD＜3%，表明血漿樣品室溫放置24h穩定。同法配制低、中、高三個濃度的QC樣品，經反復三次-20℃冰凍，室溫融化后測定樣品濃度，結果RSD＜5%，表明血漿樣品在凍融條件下穩定。
2.7 藥動學研究
A: Blank plasma; B: Plasma with standard material (2.5 μg/ml);
C: Plasma sample 1.5h after a single dose 1: Enoxacin; 2: IS
經醫學倫理委員會批準，選擇健康男性志愿者20名，平均年齡(22.4±0.8)歲，平均身高(1.73±0.05)m，平均體重(65.4±4.57)kg，試驗前體格檢查心電圖、肝、腎功能等各項指標均為正常。由本人簽署知情同意書。試驗日晨空腹服用依諾沙星片400mg，分別于給藥前和給藥后0.33、0.67、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、9.0、12.0和24.0h取靜脈血4ml，置肝素離心管中，離心、分離血漿，按“2.2”項下方法操作，測定血漿中依諾沙星的濃度，主要藥動學參數tmax、cmax、t1/2和AUC分別為(1.29±0.59)h、(3.47±0.84)μg/ml、(7.23±1.20)h和(21.5±4.23)μg·h/ml。平均藥時曲線見Fig.2。
3 討論
依諾沙星的標準品溶液經紫外掃描，最大吸收波長分別在274和345nm，在實際測定中我們采用345nm，雖然沒有274nm處響應值高，在實驗條件下血漿內源性雜質對樣品和內標無干擾，且可滿足體內樣品分析測定的需要。
本試驗優化了不同提取液、流動相，發現流動相在pH3.5的條件下分析依諾沙星和內標可得到很好的分離，且峰形對稱。采用有機溶劑提取、酸沉的方法均有內源性干擾，而采用甲醇和乙腈直接沉淀蛋白的方法無內源性干擾，用甲醇提取回收率相對要高，雖然回收率僅為50%左右，但高、中、低三個濃度下的提取回收率非常一致，提取物室溫放置穩定，且無內源性雜質干擾，重現性好。每個樣品的分析時間僅為5min，適合
本文所獲得的藥動學參數與國內外文獻［8，9］報道一致，為該藥臨床安全有效的應用及個體化給藥提供了參考依據。本文所用的方法準確、靈敏、快速，適用于藥動學研究。
參考文獻
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