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第1篇

[摘要] 該研究采用高效液相色譜法建立了市售小柴胡顆粒的指紋圖譜，并對不同廠家和同一廠家不同批次小柴胡顆粒進行了指紋圖譜研究，首次對其中7種主要指標性成分進行了指認，為小柴胡顆粒的質量評價提供了一種較為全面的分析手段。

[關鍵詞] 小柴胡顆粒；高效液相色譜法；指紋圖譜；質量評價

小柴胡顆粒是根據東漢張仲景《傷寒論》中的小柴胡湯方加工制成的現代中成藥，是中醫(yī)和解劑的代表方，由柴胡、黃芩、黨參、甘草、姜半夏、大棗和生姜7味藥組成，具有解表散熱、疏肝和胃的功效[1]。現代藥理研究表明，該方還具有較好的抗炎、保肝利膽、調節(jié)免疫、抗腫瘤等作用，在臨床上應用廣泛[2-3]。小柴胡顆粒生產廠家眾多，質量參差不齊，僅針對某個或幾個指標成分進行定性、定量分析并不能對其質量進行有效地控制，而特征指紋圖譜能較全面直觀地表征出中藥復方制劑中所含化學成分的種類和數量，進而反映該制劑內在的質量[4]。因此本研究建立了市售小柴胡顆粒的HPLC指紋圖譜研究方法，對小柴胡顆粒中7 種主要指標性成分進行同時分析測定，并用相似度評價軟件和SPSS軟件，對其指紋圖譜的特征峰數據進行了相似度計算和系統(tǒng)聚類分析，評價了不同廠家和同廠家不同批次市售小柴胡顆粒的質量，旨在為小柴胡顆粒的質量評價提供一種較為全面的分析手段。

1 材料

Agilent 1260高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；G1311C 1260Quat四元泵（美國安捷倫）；G1329B 1260ALS進樣器（美國安捷倫）；G1314B 1260VWD VL檢測器（美國安捷倫）；Rev.B.04.03[52]液相色譜工作站（美國安捷倫）；BT 125D天平（賽多利斯）；KH5200E型超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）。

本試驗收集了11個不同廠家市售小柴胡顆粒，購自全國各地零售藥店。樣品來源和批號見表1，2。將11個廠家樣品隨機編號，依次記為S1，S2，S3，S4，S5，S6，S7，S8，S9，S10，S11。

黃芩苷（baicalin，批號110715-201117）、黃芩素（baicalein，批號111595-201105）、漢黃芩素（wogonin，批號111514-201016）、甘草苷（liquiritin，批號111610-201106）、甘草酸銨（ammonium glycyrrhizinate，批號110731-201116）、柴胡皂苷A（saikosaponin A，批號110777-201108）對照品均購于中國食品藥品檢定研究院；漢黃芩苷（wogonoside，批號111014）對照品購于四川省維克奇生物科技有限公司；乙腈、甲醇為色譜純（美國Fisher），磷酸為分析純（天津市光復科技發(fā)展有限公司），水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

Agilent Zorbax SB-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B），梯度洗脫，程序見表3，流速0.8 mL·min1；檢測波長210 nm；柱溫30 ℃；進樣量10 μL。所有組分于120 min內被檢測完。

2.2 混合對照品溶液的制備

分別取甘草苷、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、甘草酸銨、柴胡皂苷A和漢黃芩素對照品適量精密稱定，置10 mL量瓶中，用甲醇定容，制成質量濃度分別為0.015 3，0.507，0.104，0.021 5，0.050 6，0.011 8，0.011 5 g·L-1的混合對照溶液，過0.45 μm的微孔濾膜，取續(xù)濾液作為混合對照品溶液，備用。

2.3 供試品溶液的制備

取同一廠家同一批次小柴胡顆粒適量，研成細粉，取約5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，稱定質量，超聲處理30 min，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。

2.4 方法學考察

2.4.1 精密度試驗 取S1廠家小柴胡顆粒樣品1份，按2.3項下方法制備供試品溶液，分別準確吸取同一供試品溶液10 μL，連續(xù)進樣6次，按2.1項下條件測定，記錄指紋圖譜，以黃芩苷色譜峰（指紋圖譜中14號峰）為內參比峰，計算指紋圖譜中各共有峰的相對保留時間和相對峰面積比值，結果表明所有共有峰相對保留時間和相對峰面積的RSD均小于3.0%，表明儀器精密度良好。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗 取S1廠家小柴胡顆粒樣品1份，按2.3項下方法制備供試品溶液，分別在0，3，12，24，48 h，按2.1項下條件進樣測定，記錄指紋圖譜，以黃芩苷色譜峰（指紋圖譜中14號峰）為內參比峰，計算指紋圖譜中各共有峰的相對保留時間和相對峰面積，結果表明所有共有峰相對保留時間和相對峰面積的RSD均小于3.0%，表明樣品在48 h內穩(wěn)定。

2.4.3 重復性試驗 取S1廠家小柴胡顆粒樣品，按2.3項下方法制備供試品溶液，平行制備6份，各吸取10 μL，按2.1項下條件測定，記錄指紋圖譜，以黃芩苷色譜峰（指紋圖譜中14號峰）為內參比峰，計算指紋圖譜中各共有峰的相對保留時間和相對峰面積，結果表明所有共有峰相對保留時間和相對峰面積的RSD均小于3.0%，表明重復性良好。

2.5 小柴胡顆粒指紋圖譜的測定及技術參數

2.5.1 不同廠家小柴胡顆粒的指紋圖譜測定及共有峰標定 取上述11個廠家小柴胡顆粒樣品，按2.3項下方法制備供試品溶液，分別準確吸取混合對照品溶液及11個小柴胡顆粒樣品的供試品溶液各10 μL，按2.1項下條件測定，記錄指紋圖譜。

將圖譜數據導入指紋圖譜相似性評價軟件分析，以S2廠家小柴胡顆粒圖譜為參照圖譜，進行多點校正，匹配色譜峰，以中位數法生成對照圖譜，結果見圖1～3。

經與對照品鑒定，21.065，49.573，90.143，98.369，102.766，104.913，110.005 min出峰分別為甘草苷（8號峰）、黃芩苷（14號峰）、漢黃芩苷（19號峰）、黃芩素（22號峰）、甘草酸銨（25號峰）、柴胡皂苷A（26號峰）、漢黃芩素（27號峰）。其中，黃芩苷（14號峰）分離度較好，峰面積較大且穩(wěn)定，故選其為參照峰（S）。以黃芩苷為參照峰的HPLC指紋圖譜確定共有峰29個，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積值，結果表明，11批不同生產廠家小柴胡顆粒相對保留時間的RSD較小（0～0.78%），而相對峰面積的RSD較大，說明小柴胡顆粒指紋圖譜中主要峰群的直觀特征基本一致，但各成分含量有較大的區(qū)別。

2.5.2 同廠家不同批次小柴胡顆粒的指紋圖譜測定 取上述S3和S11廠家各5個批次小柴胡顆粒樣品，按2.3項下方法制備供試品溶液，并按2.1項下條件測定，記錄指紋圖譜，見圖4，5。

2.5.3 相似度評價 采用國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2004A版）》評價2個廠家不同批次小柴胡顆粒的指紋圖譜，分別以S2，批號111249，110903圖譜為參照譜，以中位數法生成對照指紋圖譜，計算樣品與共有模式之間的相似度，評價樣品質量，見表4，5。

2.5.4 樣品色譜數據的系統(tǒng)聚類分析 運用SPSS軟件，對所得高效液相指紋圖譜數據進行聚類分析。采用組件均連法（average linkage between groups），利用夾角余弦（cosine）作為樣品的測度，聚類分析將不同廠家樣品分為3類。其中廠家S3，S4，S11分在第I類，廠家S1，S2，S5，S6，S7，S8，S9分在第II類，S10分在第III類，見圖6。由結果可知，不同廠家的小柴胡顆粒樣品存在不同程度的質量差異。

3 討論

由于黨參、姜半夏、大棗和生姜4味藥材在該提取方法和色譜檢測條件下很難被檢測出來，所以在小柴胡顆粒指紋圖譜上沒有體現這幾個藥材的相關信息。

不同廠家和同一廠家不同批次的小柴胡顆粒樣品指紋圖譜相似度均大于0.9，表明各樣品相似度較好。不同廠家樣品之間相對含量RSD有差異，甚至某些組分差異較大，可能是由于不同生產廠家生產工藝參數、生產設備性能、對中藥材有效成分提取率的差異，造成了產品成分含量的差別，但各廠家樣品的指紋圖譜整體面貌相似，所建立的指紋圖譜相對保留時間重復性良好，相似度較高，可以作為鑒別小柴胡顆粒質量的指標之一。

聚類分析結果顯示，不同廠家被聚為3類，說明廠家間質量有所差異，原因可能是相似度的計算是按各色譜峰的峰面積中位數生成共有模式，其分析的是每張指紋圖譜的各個色譜峰；而聚類分析的計算是利用組件均連法，采用夾角余弦測定的，其分析的是各個指紋圖譜的共有峰，所以2種分析結果有所區(qū)別，但相似度結果中S10樣品相似度相對較低，在聚類分析結果中被單獨聚為第III類，說明2種分析結果大體相一致。

[參考文獻]

[1] 中國藥典. 一部[S]. 2010：509.

[2] 謝樂.小柴胡湯的藥理研究及該方在發(fā)熱性疾病中的應用[J]. 現代醫(yī)藥衛(wèi)生， 2007， 23（19）： 2930.

[3] 姜雪，李佳. 小柴胡湯的臨床應用與藥理研究[J]. 長春中醫(yī)學院學報， 2006， 22（1）： 81.

[4] 王曉軍，張春玲. 指紋圖譜技術在中藥質量控制中的應用[J]. 甘肅中醫(yī)學院學報， 2004， 21（3）： 44.

Study on fingerprint of Xiaochaihu granules sold in the market

YAN Lei， LIN Long-fei， ZHANG Hui， DANG Xiao-fang， NI Jian*

（School of Chinese Material Medica， Beijing University of Traditional Chinese Medicine， Beijing 100102， China）

[Abstract] To establish a fingerprint of Xiaochaihu granules sold in the market with HPLC method， and study fingerprints of Xiaochaihu granules produced by different manufacturers and in different batches of the same manufacturer. Seven major index components were identified for the first time. The established method provided an all-around analysis on the quality assessment of Xiaochaihu granules.

第2篇

大美容概念

美容、理療、食療、心理疏導“四位一體”

大美容雖依托原有美容會所發(fā)展，但不能完全按照模式來操作，其發(fā)展和壯大的基礎是專業(yè)服務：美容師進行護膚指導；健康專家為亞健康人群診斷癥狀，提出診療方案；營養(yǎng)師根據顧客體制、癥狀，配制膳食；心理咨詢師負責心理輔導、咨詢。

現在，已有不少先行者在探索這一新業(yè)態(tài)，有些會所集美容、理療、食療、心理疏導四位一體，打造亞健康人群的健康新概念，涉及項目繁多，例如涵蓋的阿膠文化、藏藥文化、燕窩文化、蟲草文化、湯文化令人目不暇接；虹膜檢測、基因檢測、經絡檢測、血壓檢測、血糖檢測、女性乳腺檢測等體貼入微；健康補給、食療、理療、孕嬰等項目應有盡有。除了全面性的“大美容”概念會所，更為普遍的是將以上項目中的兩三個進行整合的。比如，美容會所下增設養(yǎng)生泡浴會所，規(guī)定凡是美容會所會員達到一定積分后就可以免費享受養(yǎng)生泡浴一次；再比如美容會所旗下開設茗茶館，將花草茶養(yǎng)生文化貫穿其中，與美容會所的健康理念相得益彰。

除此之外，有關資料顯示，心理處于亞健康的人比身體亞健康的人要多得多。而在我國，有很大一部分人還不太重視心理亞健康的防治，這塊市場潛力非常大。因此，如若大美容項目能在這方面有所突破，或可走出一片新天地來。

大美容形象

“六化”帶來新氣象

“六化”包括形象專業(yè)化、裝飾溫馨化、經營多元化、營運標準化、服務專業(yè)化、管理科學化。

1.形象專業(yè)化

為什么有些并不需要去打針吃藥的亞健康癥狀的顧客，會更相信醫(yī)院而不相信美容會所呢？因為大多數醫(yī)院的硬件設施都非常專業(yè)，人員感覺更加專業(yè)，環(huán)境也簡單整潔，儀器使用也很標準，使得美容會所在大部分的印象中相差甚遠。造成這個原因，是因為許多美容會所經營者雖然在店面的裝潢上有投入，但很多美容會所顯得光線暗淡、店內色彩凌亂，加上胡亂擺放的儀器，根本無法吸引顧客踏進美容會所，這是為何很多人都愿意去醫(yī)院解決亞健康問題的原因之一。

作為想走大美容路線的經營者，可以考慮將美容會所的形象專業(yè)化，如用燈光配合商品――白色光線配合高科技美容儀器、進口美容產品、藥妝等，顯現科技感的特征；而中醫(yī)藥油、芳香精油等，則用紅色背景作映襯，外加射燈照射，突出其檔次不凡。另外，店內除了播放音樂，還可以不間斷地播放健康小知識、小常識等，但要將音量調得適中，給顧客輕松、愉快的感受。

2.裝飾溫馨化

要營造一種溫馨、親切的氣氛，商業(yè)味不可過重。比如，許多美容會所的墻上都是產品廣告、美容會所的企業(yè)文化等宣傳，沒有從顧客的角度來設計，也沒給顧客開設一塊休閑的場地，導致顧客進到美容會所就覺得被產品轟炸的頭疼。這里建議，美容會所在裝飾時應給顧客家一樣的感覺，營造溫馨氣氛，不妨在醒目的地方做一些健康提醒，給缺乏健康意識的顧客帶來科普知識；開辟一個休閑區(qū)，顧客平時路過會所，就算不做療程，也可以坐下來看看雜志、喝喝茶、聽聽音樂；將咨詢區(qū)設置得私密些，保護顧客隱私等。

一家以養(yǎng)生、亞健康調理為主營項目的會所管理者說：“我們在內飾這方面充分的借鑒了醫(yī)院，例如醫(yī)院門口處設有無障礙區(qū)傾斜坡道，以確保坐輪椅或腿腳不方便的人士輕松入店。對健康調理中心來說，如果接待的顧客都是年紀稍長的，至少該將臺階鋪設的平緩些、樓梯燈光稍明亮些。來我們這里調理的顧客，有些患有慢性關節(jié)炎的，他們的病痛發(fā)作起來最需要人安慰。所以，我們規(guī)定當顧客進入店內，一定會微笑接待，給他們心理上的安慰。”這家店內隨處可見為顧客考慮的用心布置，例如咨詢臺，為了確保從外面看不到咨詢顧客，采取獨立隔斷間的形式裝修。此外，為了讓美容師在提供咨詢服務時，不與顧客正面對視，特將咨詢桌裝修成45度角的形式，使美容師從這個角度看向顧客的目光更柔和。

3.經營多元化

除了經營常規(guī)面護、身體等項目外，還可以涉及個人護理用品、藥妝、孕嬰童產品、功能性飲料等。這里推薦一家纖體會所的做法，感興趣的美容會所經營者不妨學習一下，“我們的店內不太愛陳設套盒，所有的套盒都在無塵的恒溫倉庫保管，這一方面考慮到衛(wèi)生性，另一方面也給顧客尊貴的體驗。因為是做纖體的，店內我們會陳設一些健康零食，如進口杏仁等，以及一些個人護理用品，如衛(wèi)生巾等。我們的顧客常常說，最好能開個專門的健康便利店，這個建議我們正在考慮。”

4.營運標準化

要有一套標準化的大美容營運模式，不少美容會所的營運模式重復改變，經營者在標準上搖擺不定，導致模式執(zhí)行者在實際營運中產生逆反心理。在國內，營運標準化比較到位的會所各地都有很多，不管是其店面招牌、櫥窗形象、店內設施設備、商品陳設等方面，還是店員的儀容儀表、接待用語、顧客回訪、采購管理、財務管理、GSP管理等都非常標準，可以達到上百家門店以同樣的標準營運。

5.服務專業(yè)化

員工的專業(yè)化和大美容提供的產品、服務要相適應，做大美容，首先必須讓專業(yè)的人做專業(yè)的事，合理配備美容師、心理咨詢師、營養(yǎng)師等；其次，要在專業(yè)化服務的基礎上，根據顧客的自身情況開展個性化服務，如上門美容、配送養(yǎng)生膳食、提供個人電子保養(yǎng)手冊、季節(jié)性養(yǎng)生建議等。比如，一家美容會所不僅開辦了養(yǎng)生食療中心，向顧客提供養(yǎng)生咨詢服務和排毒蔬果套餐，同時還提供營養(yǎng)師的上門養(yǎng)生湯粥烹飪法指導。此外，該美容會所還在冬季滋補季節(jié)，在國醫(yī)大師的指導下，提供冬季膏方養(yǎng)生搭配。每到一個節(jié)氣，制訂出該節(jié)氣時令應該注意的養(yǎng)生事項，在美容會所的接待室公布，同時在網絡以主頁形式信息情報。

6.管理科學化