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關鍵詞：市場法 價值乘數 多元回歸
一、市場法及價值乘數的概念
市場法就是在現實公開交易市場上尋找相同或者相似資產作為可比對象，通過分析可比對象交易價格或者合理報價來分析確定資產的價值。市場法的核心思想就是以“價值乘數”為中介，以可比對象在現實市場上的成交價格或者合理報價為基礎，通過對比分析可比對象與被評估資產的相關因素，分析確定被評估資產的價值。市場法中常用的兩種方法是上市公司比較法和交易案例比較法，兩種方法都需要選擇可比對象，不同的是所選可比對象的來源和途徑有所不同，而兩種方法相同的是，必須要確定對比分析的基礎――價值乘數。
價值乘數又稱價值比率，本文主要對價值比率做一定的探究，實務中價值比率的應用會根據企業性質的不同，有各種類型的價值乘數，但它們大多是基于常用的三種價值比率進行變形，所以本文主要對基礎的三種價值比率――市盈率、市凈率和市銷率加以分析，探究影響其大小的決定性因素，分析其優缺點，并做出一定的改進。
二、 市盈率
市盈率又稱收益乘數（PE比率），是指在一個考察期內，股票的價格和每股收益的比率，其基本表達式：P/E=每股股價/每股收益。
（一）優點和局限
優點：首先，這是一種具有直觀吸引力的統計方法，它將被評估資產的價值與標的資產目前的收益聯系起來。其次，對于大多數股票來說，PE比率很容易計算，也隨處可得，這使得評估師在使用這一指標時會很方便。再次，使用PE比率可以不用考慮風險、增長和股息支付比率，而所有這些在用收益法中的折現現金流量法評估時所必須要考慮的。最后，市盈率更有可能反映市場狀況和前景預測。如果市場投資者對股票的投資熱情重新高漲，這些股票的市盈率也將提高，反映出這種樂觀的情緒。
局限性：對于收益為負數的公司，市盈率的使用就會受到限制，市盈率就失去了意義；市盈率除了受企業本身基本面的影響以外，還受到整個經濟景氣程度的影響。在整個經濟繁榮時市盈率上升，整個經濟衰退時市盈率下降。除此之外市盈率還存在兩個主要的缺陷：第一，市盈率受到資本結構的系統性影響。主要體現在投資者要求的報酬率或者股權資本成本上。第二，凈利潤是扣除了非經營性損失之后計算得到的。因此，一項非現金注銷，將顯著降低利潤（對于價值沒有可比性的效應），導致市盈率被人為提高。
（二）基本分析
影響市盈率的不僅僅是每股股價和每股收益，將公司的基本數據納入考慮之中，則可以找到影響市盈率高低的決定因素。
市盈率使用的前提是，公司處于持續經營中，而根據公司所處狀態不同，市盈率評估模型也有所不同。一個處于穩定狀態的公司，即處于穩定增長狀態的公司，其增長率與整個經濟的名義增長率接近，根據高頓增長模型，其股權價值為：P0=DPS1/r-gn。這里，P0是股票價值；DPS1為下一年的預期股息；r是投資人要求的報酬率或股權資本成本；gn為股息的永久增長率。
而DPS1 =EPS0×s×1+gn。其中EPS0為初始年份的每股收益；S為股利支付率。將其帶入高頓增長模型公式：P0=[EPS0 ×s×1+gn]/r-gn 。公式兩邊同時除以EPS0可以得到用基本數據表示的市盈率公式。P/E=s×1+gn/r-gn 。由此公式可以看出，穩定型公司的市盈率P/E會受到股利支付率、期望報酬率（股權資本成本）和股利的增長率的影響。
處于增長期的公司的比率同樣可以和基本數據聯系起來，增長期公司適用于兩階段股息折現模型，即前期處于高速增長階段，后期處于穩定階段。其基本公式如下所示：
P0=DPS1×[1-1+gn/1+rn]/r-g+DPSn/[r-gn×1+rn]
其中DPS1=EPS0×s×1+g，DPSn=EPS0×s×1+gn×1+gn，將兩等式帶入上述公式并且兩邊同時除以EPS0可得如下所示：
P/E={s×1g×[1-1+gn/1+rn]}/r-gs×1gn×1+gn/[r-gn×1+rn]
其中，g為增長期股息的增長率，gn為穩定期股息增長率。
由上述等式可以看出，決定市盈率高低的要素依然是股息支付率、股權資本率以及股息增長率。因此，無論是處于增長期還是穩定期的公司，在使用市盈率評估時，都會受到股息支付率、股權資本率以及股息增長率三個基本因素的影響。
三、 市凈率
市凈率又稱為權益乘數，是指股權市場價值和賬面價值的比率，其基本公式為：P/BV=股票市場價值/賬面價值。
（一）優點和缺陷
市凈率的優點：首先，相對于市盈率來說，即使是收益為負的公司，不能使用市盈率進行評估，但可以使用市凈率進行評估。其次，與市場價格相比而言，賬面價值提供了一種相對穩定、符合直覺的價值評估方法。通常情況下，人們總是感覺賬面價值比內在價值更加可靠、清晰，因此賬面價值是一種非常簡單的比較標準。最后，如果會計標準合理，而且不同公司之間會計標準一致，市凈率可以作為一個低估或者高估的信號，在同類公司中進行比較，以便于評估師對可比公司的選擇。
采用市凈率也存在一些缺陷：第一，賬面價值和盈利一樣會受到折舊方法和其他會計政策的影響，當企業之間采用不同的會計政策時，將難以使用市凈率對不同的企業進行比較，同樣，當不同國家采用的會計制度或準則存在重大差異時，利用市凈率進行跨國間的企業價值評估也將失去意義。第二，賬面價值對于某些沒有太多資產的行業來說意義不大，比如服務行業。第三，如果企業連續多年虧損，那么企業權益的賬面價值可能為負，相應地，市凈率也會變為負值，因此對于多年虧損的企業，市凈率很可能不能使用。第四，賬面價值反映的是初始成本，如果在獲得一項資產后，其盈利能力顯著增加或降低，那么，其賬面價值就會與市場價值產生顯著差異，再用市凈率來評估就會顯著低估或者高估價值。
（二）基本分析
同市盈率一樣，影響市凈率大小的，不僅僅是股票的市場價值和賬面價值，還有更深層次的基本因素對其有決定性的作用。
對處于穩定增長狀態的公司，適用于高頓模型計算其股權價值。高頓模型如下：P0=DPS1/r-gn
同樣，P0是股票價值；DPS1為下一年的預期股息；r是投資人要求的報酬率或股權資本成本；gn為股息的永久增長率。而DPS1=BV0×ROE×s，其中ROE為下一年度的凈資產收益率，s為股利支付率，又s=1-gn / ROE，將兩個等式帶入高頓模型，且兩邊同除以BV0可得：P0/BV0=ROE-gn/r-gn。
由此可見，穩定增長公司的市凈率大小是由凈資產收益率、股息增長率和股權資本成本決定的。
對于增長型公司，同市盈率一樣，適用于兩階段增長模型?；灸Ｐ腿缦拢?/p>
P0=DPS1×[1-1+gn/1+rn]/r-g+DPSn/[r-gn×1+rn]
其中DPS1=BV0×ROE×s ×1g，DPSn=BV0×ROE×s×1gn ×1+gn，將它們帶入基本模型公式且兩邊同時除以BV0可得：
P0/BV0={ROE×s×1g×[1-1+gn/1+rn]}÷r-g+[ROE×s×1gn×1+gn]÷r-gn×1+rn
由此公式可見，影響增長型公司的市凈率高低的因素同樣是凈資產收益率、股權資本成本、股利支付率以及股息增長率。
四、市銷率
市銷率又稱為收入乘數，是指股票價值和企業收入之間的比值。其基本公式為：P/S=股票價格/每股收入。
（一）優點和弊端
市銷率因其獨特的優點而備受關注，首先，它不像市盈率可能會是負值而變得毫無意義，市銷率在任何情況下都可以使用，甚至對于最困難的公司也可使用。其次，與凈利潤和賬面價值不同，銷售收入不受折舊、存貨等會計政策的影響，因而也難以被人為的擴大。再次，市銷率并不像市盈率那樣易變。因此，用市銷率進行價值評估更為可靠。例如，對于一家周期性公司，其市盈率值變化要比市銷率變化頻繁得多，這是因為利潤比銷售收入對經濟狀況的變化更為敏感。
當然，采用市銷率比率也有些弊端，用銷售收入來代替賬面值或凈利潤的好處之一是它的穩定性。然而這種穩定性，在公司的成本控制出現問題時，就失去價值評估的準確性。在這種情況下，盡管利潤和賬面價值有顯著的下降，但是銷售收入可能不會大幅下降。因此，當使用市銷率對一個存在虧損或資不抵債的處境艱難的公司進行價值評估時，可能因為無法識別各個公司成本、毛利率方面的差別而得出不準確的評估值。
（二）基本分析
同市盈率、市凈率一樣，對于市銷率的基本分析，同樣將公司分為穩定型和增長型，穩定型公司適用于高頓模型，增長型公司適用于兩階段模型。其計算過程和市盈率、市凈率相似，在此不再計算，其最終等式如下：
穩定型：P/S=PM×s×1+gn÷r-gn，其中PM為凈利潤率。
增長型：P0/S0=PM×s×1+g×[1-1+gn/1+rn]÷r-g+PM×s×1gn×1+gn÷[r-gn×1+rn]
由以上兩個等式可以看出，無論是企業處于增長期還是穩定期，影響企業市銷率的因素是凈利潤率、股權資本成本、股利支付率和股息增長率。
應注意的是，三個比率的基本分析都是以股權價值為基本切入點，理論上股權價值等于股票價格，而實際上，股票價格受到多種因素的共同影響，因此，用股票價值為切入點來分析三比率得到的是一種理論上的價值比率。
五、問題和改進
（一）市場法適用性問題
市場法的應用必須要滿足兩個最基本的前提條件：第一，要存在一個公開活躍的資本市場；第二，市場上要存在充分的可比案例或者交易活動。公開市場指的是有多個交易主體在自愿、平等、理智、非強制或者不受限的條件下進行的交易，這個市場上的買賣雙方獲取的信息量相當，交易價格代表了交易資產的行情，也就是資產的市場公允價格?，F實中，幾乎沒有能夠完全滿足上述市場法應用條件的公開市場條件。公開市場假設是基于資產可以在市場公開買賣這一客觀的事實為基礎的。從現實情況來看，對于用上市公司比較法評估企業價值而言，至少已經存在證券市場這樣一個活躍的公開市場。許多文獻在談及市場法時，均認為我國資本市場處于發展的初級階段，尚未成熟，資本市場上的信息不能準確真實地反映企業的價值，據此認為市場法在我國尚不能廣泛的運用。筆者認為，資本市場的主要功能有融資、投資、資源配置和資產定價功能，其中與上市公司比較法運用聯系最為緊密的就是市場對資產的定價功能。由于垃圾信息、市場預測、“噪音”干擾以及信息不對稱等原因，使得定價不能總是一步到位，但是這并不能否認定價功能的效率。當價格在某一個階段、某一個適當的時間范圍內總體趨于一定的情況下，就表示資本定價功能發揮正常。
（二）實務中存在的問題
市場法在應用中，首先需要找出一組可比公司，根據《企業價值評估指導意見》中第三十七條“注冊資產評估師應當確信所選擇的可比企業與被評估企業具有可比性。可比企業應當與被評估企業屬于同一行業，或者受相同經濟因素的影響”的規定，實務中評估師一般會選取屬于同一行業的一組公司作為可比公司。而采用這種方法有幾個問題：
第一，可比公司的定義基本上是個主觀上的概念，評估師在選擇可比公司時，大多數是靠個人經驗，因此不同評估師所選可比公司不同，其評估結果肯定會有所不同。將行業中其他公司作為一組也經常不能解決問題，因為同一行業中的公司在業務組合、風險和增長率等方面也存在很大的不同。
第二，就目前我國的資本市場來說，由于資本市場并不是很健全，有些行業上市公司很少，例如根據申銀萬國最新的行業分類來說，三級分類通信運營中，只有中國聯通和263兩家上市公司。對于通信運營類公司用市場法評估而言，則很有可能找不到合適的可比上市公司。
第三，即使能夠找到一組合適的可比公司，被評估公司與可比公司之間的基本差異仍然存在，由以上對市盈率、市凈率和市銷率的基本分析可以看出，影響三大指標高低的基本因素有凈資產收益率、凈利潤率、股權資本成本、股利支付率以及股息增長率等基本數據，所以很難找到合適的可比公司，即使通過一些主觀的調整，也很難找到一組在各個方面都合適的可比公司。
（三）相應改進
鑒于以上問題的存在，在實務中運用市場法時需要評估師盡可能做到客觀、公正，避免個人主觀的偏見。而在實務中，每個評估師主觀經驗的不同，評估結果就會不同?；诖?，在用市場法評估時，需要找到一些輔助方法進行驗證，可以借鑒市場法運用較多國家的一些成熟方法。
美國的資產評估業有100多年的歷史，在對企業價值評估方面，市場法是常用方法之一，因此可以借鑒他們在市場法方面的經驗，在缺少相應的可比公司時，美國偏向于使用多元回歸分析方法來確定市盈率、市凈率以及市銷率等價值比率。具體方法如下：
以市盈率、市凈率以及市銷率作為因變量，根據前面的分析，可以找到影響各個比率的基本數據，將基本數據作為自變量進行多元回歸，具體表達式如下：
市盈率=α0+α1×股息支付率+α2×股權資本成本+α3×股息增長率
市凈率=β0+β1×股息支付率+β2×股權資本成本+β3×股息增長率+β4×凈資產收益率
市銷率=γ0+γ1×股息支付率+γ2×股權資本成本+γ3×股息增長率+γ4×凈利潤率
可以采用行業數據回歸分析和整個市場數據回歸分析兩種方法，當被評估公司所在行業上市公司較多時，可以使用行業數據回歸分析，作為可比公司的輔助驗證。而當所在行業上市公司很少時，如上面所說的通信運營三級分類中只有兩家上市公司，則可以擴大回歸分析的樣本范圍，可以使用所在行業的二級分類中的上市公司作為樣本或者一級分類所包含的上市公司，甚至可以使用完全不同行業的上市公司數據來進行回歸分析，求得回歸系數，將被評估公司的相應基本數據帶入回歸方程式便可求得被評估公司的市盈率、市凈率及市銷率。若使用整個市場的數據進行回歸分析，則要考慮更多的因素。如由于行業不同，面臨的行業風險也會不同。
（四）注意問題
回歸分析方法是價值評估常用三大比率的一種簡便途徑，它將價值比率和影響其大小的基本因素通過方程式聯系起來，而這些基本數據對于上市公司來說很容易取得，因此，多元回歸分析方法在實務中運用非常方便，但是此方法本身也存在一些缺陷，如有可能基本數據因變量和價值比率之間并不是線性相關的，或者基本數據之間具有很強的相關性等，這些不確定性的因素都會影響回歸模型的有效性，因此需要評估師在使用模型時，對其進行相應的檢驗。
參考文獻：
1.（美）Aswath Damodaran.張志強，王春香譯.價值評估[M].北京：中國勞動社會保障出版社，2004.
關鍵詞：決策樹;Logistic回歸;超額收益;基本面指數
中圖分類號：F830.91 文獻標識碼：A 文章編號：1003-5192(2009)03-0057-04
Research on Constructing Stock Price Constituent Index
WANG Xin, YIN Liu-zhi, FANG Zhao-ben
(School of Management, USTC, Hefei 230026, China)
Abstract:Based on decision trees and Logistic regression, we select constituent stocks and determine their weights with fundamental factors.Fundamental stock price constituent index(JOYFI300), created as a guidance to fundamental investment, is testified better on excess return.Firstly, two selection measures, net profit and trading value, are chosen by using decision trees, and then initial samples of constituent stocks can be found out by these two factors.Secondly, the influence of fundamental factors on weights of constituent stocks can be analysed and determined by Logistic model.Finally, after testing and comparing we find that JOYFI300 Index is better on excess return than Shanghai-Shenzhen 300 and CITIC/S&P 300 Index.
Key words:decision trees; Logistic regression; excess return; fundamental index
1 引言
目前流行的股票價格指數通常僅以股票市值作為加權因子，而股票基本面因素在決定指數成份股構成時，雖然也有所考慮，但在決定權重時卻未能具體體現這些因素。另一方面，少數指數雖然已把基本面因素作為加權因子，但采用了主觀的等額定權方法，客觀依據不足，難以給出合理的經濟解釋?；谶@一現狀，本文運用決策樹技術確定基本面指數選股原則和成份股初始樣本；之后再以基本面變量作為加權因子建立Logistic模型，通過模型擬合區分各因子對樣本股進入指數的影響程度，進而確定成份股構成及各自權重。本文將應用上述方法選擇300家成份股編制基本面300指數（簡稱“JOYFI300”）。
本文研究的意義在于，通過引入基本面因素選擇成份股并確定權重，使價值低估的股票能獲得更合理的權重，從而優化指數的風險收益特征［1］；為市場提供一種可交易的良好基準［2］，引導基于基本面投資的理念；為組合投資者提供一種構建投資組合的新方法［3~5］，以提高資產配置的效果，促進金融工程技術的應用。
2 綜述
2．1 股票價格成份指數編制現狀及最新進展
現有股價成份指數選樣標準過于簡單，大多只考慮市值規模和流動性因素；從定權方法上，國內所有股價成份指數均采用流通市值加權，還沒有指數采用基本面因素定權。市值加權的優點是權重易于確定，能夠給予直觀的解釋；缺點是隨著股票價格的變化，各成份股所占權重隨之變化，同時很難設計出調整機制使權重回到合適的水平。而基本面因素加權卻可經由再平衡（Rebalance）機制使權重回到初始的水平，即通過減少波幅靠前股票的比例，增加波幅落后股票的比例，使成份股權重新回到期初水平，以糾正投資偏差。
國際上已有少量指數采用基本面因素加權，但定權方法較為主觀，客觀依據不足，難以給出合理的經濟解釋。目前公開考慮基本面因素的指數有［6］：(1)道瓊斯股價指數體系中道瓊斯全球、行業和亞洲頂尖50指數三個風格指數都是按照自由流通市值、銷售/收益（S/E）、凈利潤進行綜合排名，權重分別為60％，20％，20％，但最終成份股權重仍然采用自由流通市值。這里流通市值仍被作為最重要的選股標準，2個基本面變量也僅按等權進行處理。(2)富時股價指數體系中RAFI系列指數，基于Robert［7,8］的研究框架，以銷售收入、現金流、股息、賬面價值為指數選股標準，但4個變量同樣按等權進行計算。(3)標準普爾股價指數體系中成長價值風格系列指數也類似地選擇成長型和價值型變量共7個變量作為加權因子，具體定權方法未公開披露。
2．2 決策樹和Logistic回歸
決策樹［9］是用于分類和預測的預測型建模方法。它的優點是分類判定方法簡單高效，生成的規則易于解釋和理解，適于分類變量的數據處理；但不易于處理連續型數據。作為數據分類的一種有力工具，決策樹在管理、金融、生物統計等領域得到了廣泛應用。簡單來說，運用決策樹進行數據分類一般分為兩個步驟：(1)決策樹歸納，即利用訓練數據構建決策樹，生成分類規則。(2)應用決策樹預測檢驗數據，確定數據類別。第2步決策樹的應用相對簡單。第1步決策樹結構的擬合是需要重點考慮的，不同的決策樹可能產生不同的分類結果。
在構建決策樹進行數據分類和預測前，需對數據進行以下預處理：(1)數據清理（Data Cleaning）。包括缺失值的處理和數據噪聲的消減；(2)相關性分析（Correlation Analysis）。訓練樣本的某些數據屬性可能是冗余的，與分類并不相關，通過相關性分析將這些多余的屬性刪除；(3)數據變換（Data Transformation）。例如：將連續數據通過聚類分析或概念化分層轉換為分類數據；對數據進行標準化，使數據取值進入指定區間，如（0，1）等。
自上世紀70年代以來Logistic回歸模型的研究逐步得到深入［10］，它的優點是：(1)適用于因變量是分類變量（可以是二分類或多分類）的數據處理；(2)對于自變量的分布沒有正態假設條件，數據類型既可以是連續變量、離散變量、也可以是啞變量（Dummy Variable）；(3)未作方差齊性假設；(4)要求因變量與自變量之間是非線性關系（S型曲線），假設服從Logistic分布。若假設服從標準正態分布，則為Probit模型。當觀測數據尾部較厚，或自變量為連續變量時，采用Logistic模型更為適當。
記給定自變量取值xki時事件發生的條件概率為
P(yi=1｜x1i,x2i,…，xmi)=pi
得到Logistic回歸模型（1）式，α、βk分別表示Logistic模型的截距項和各自變量回歸系數。
pi=exp(α+∑nk=1βkxki)1+exp(α+∑nk=1βkxki)（1）
上式可轉換為Logit形式：ln(pi1-pi)=α+∑nk=1βkxki。如果因變量和自變量的觀測值已知，就可估計出模型各項系數，這些系數估計值可以解釋為各自變量在模型中所起的作用。
3 JOYFI300指數的編制
以每年4月30日為基準，將該日滬深兩市所有已上市A股作為樣本，但需剔除：(1)ST、*ST股和暫停上市股票；(2)最近一年發生重大違法違規事件；(3)最近一年財務報告未及時披露或有重大問題；(4)上市不滿11個交易日的公司。所有數據均取自wind金融數據庫。
3.1 決策樹分類變量
本文選擇13個變量作為決策樹分類變量(見表1)。后五類基本面指標在進行決策樹分類前均進行了加權標準化。即先對數據進行市值調整，以其占全體樣本取值總和的比例作為最終取值。市值調整以公司實際流通市值占公司總市值的比例為權重。為提高決策樹分類效果，運用聚類分析將后六類連續型變量進一步離散化為分類變量。
表1 決策樹分類變量
序號變量代碼變量名稱變量屬性序號變量代碼變量名稱變量屬性
1zccz資產重組二分類8gsgrow銷售增長量連續
2cgjzd持股集中度二分類9bv賬面價值連續
3zrz再融資二分類10np凈利潤連續
4hydw行業地位三分類11gs銷售收入連續
5hydbx行業代表性三分類12gd股息總額連續
6cjje成交金額二分類13ygrs員工人數連續
7gdgqxz股東股權性質四分類
3．2 決策樹訓練樣本及分類變量相關性分析
從4個類似的300指數（滬深300、中信標普300、申萬300和巨潮300）中選取相重合的成份股作為決策樹“宜進入指數”的訓練樣本；將6個連續變量按取值大小排序，將至少有5個變量排名在下1/2分位的股票做為“不宜進入指數”的訓練樣本。
根據訓練樣本數據，對上述變量分別與因變量（是否進入指數）作pearson χ2檢驗。在95％置信水平下均拒絕原假設，即它們與因變量間存在顯著的相關性關系。
3．3 成份股的選擇與定權
采用R語言擬合決策樹，樹結構見圖1。np和cjje兩個變量就決定了樹的結構，說明僅股票業績和流動性是JOYFI300成份股的選樣標準。本文通過對數據的加權標準化將市值因素引入基本面變量，在基本面變量中間接反映公司市值大小，因此JOYFI300與其他成份指數選樣標準的差異正是體現在經市值調整的凈利潤指標上。根據樹結構對其余樣本進行分類，選出符合分類標準的股票，與“宜進入指數”的訓練樣本共同構成JOYFI300成份股初選樣本。
表2 Logistic模型變量選擇結果 （α＝0.05）
變 量系數估計值Wald置信區間Wald χ2P值
bvβ^1=4.1707（β^1－1.01，β^1＋1.01）65.8792
npβ^2=10.5788（β^2－2.18，β^2＋2.18）90.4159
gdβ^3=2.8356（β^3－1.62，β^3＋1.62）11.83130.0006
gsgrowβ^4=0.5776（β^4－0.54，β^4＋0.54）4.37020.0366
記成份股初選樣本因變量y為1，否則為0。運用逐步選擇法（Stepwise）對6個連續變量進行變量選擇，采用SAS的Proc Logistic［11］程序計算，系數估計值顯著性檢驗（Wald檢驗）的結果見表2。賬面價值、凈利潤、股息總額、銷售增長量4個變量P值顯著小于α＝0.05，故拒絕原假設（H0: βk=0）。各初選樣本的評分可由(2)式得到，scorei就是第i只初選樣本股票的基本面得分。根據評分大小選出前300家股票作為指數成份股。各成份股最終權重由公式weighti=scorei/∑iscorei計算。scorei=1×bvi+2×npi+3×gdi+4×gsgrowi(2)
圖1 決策樹結構
3．4 JOYFI300指數樣本期間及計算
以2005年4月30日為基期，基點1000點,模擬計算2005年5月至2007年10月JOYFI300指數。根據各成份股加權收益率計算每日指數收益率的變動，再換算成每日指數變動值。成份股分配現金紅利會使流通市值發生變動，JOYFI300對此的處理是考察期內維持其權重不變，這相當于在跟蹤JOYFI300進行指數化投資時，紅利即時再投資于該股。
4 JOYFI300指數的評價與比較
4．1 風險收益特征
再平衡機制能夠使權重回到合適的水平，但也會提高指數的周轉率，增加交易成本，因此需要考量再平衡的調整頻率。通過比較樣本期內各指數的總收益率（表3），每半年和不進行再平衡由于收益特征未表現出顯著差異被首先否定，每月再平衡總收益率雖比每季再平衡略高，但是若考慮成份股周轉時的交易成本，顯然每季再平衡總收益率更優。后文在進行指數評價時均采用按季再平衡的JOYFI300指數。
表3 各類指數總收益率比較（2005年5月~2007年10月）
JOYFI300（每月再平衡）JOYFI300（每季再平衡）JOYFI300 （每半年再平衡）JOYFI300（未再平衡）中標300滬深300
總收益率587％582％532％453％500％510%
表4 各指數收益特征比較
指數最大月收益率最小月收益率幾何平均月收益率幾何平均年收益率年超額收益（參照滬深300）年波動率偏度峰度
JOYFI30030.74%-7.28%6.611%115.58%10.84%28.795%1.3050.421
中標30027.14%-8.61%6.153%104.74%-1.40%27.614%1.2080.140
滬深30027.93%-8.20%6.214%106.14%-27.722%1.2360.229
JOYFI300在各項收益率指標（表4）上都高于兩比較指數；年波動率與中標300、滬深300相比分別增加1.181%、1.073%，但年均收益率增幅遠遠超過年波動率的增幅，分別到達10.84%、9.44%。偏度為正且略大說明收益率的分布較其他指數呈現更明顯的右偏，即在JOYFI300收益率分布的右側存在更多的極端值。峰度略高表明尖峰厚尾特征更為顯著。峰度偏度數據清晰地顯示JOYFI300收益率分布比其他指數具有更優良的性質，它的右尾部（正收益率）有更多更大的數據點分布，可能具有更高的均值水平。參照其他兩種指數對JOYFI300月超額收益進行均值檢驗（H0：月超額收益≤0），P值顯著小于0.05，說明JOYFI300月超額收益顯著不為零，月收益率均值水平比其他兩種指數更高。
基于資本資產定價理論的分析框架，從投資組合的角度考察各指數的風險收益特征(見表5)，JOYFI300仍然表現出良好的特性?；久嬷笖到M合的β系數比滬深300略低，與中標300大體相當；經風險調整后的投資組合超額收益（Jensen）也表現為JOYFI300更優。
表5 基于CAPM的風險收益特征（參照滬深300按月收益率計算）
指數βPearson相關系數超額收益IRJensen
JOYFI3000.99598.08%0.397%0.22310.00428
中標3000.95699.78%-0.060%-0.09590.00201
4．2 指數穩定性
JOYFI300的結構調整包括兩個方面:成份股定期和不定期的調整、指數權重再平衡。表6中平均周轉率的計算綜合考慮了這兩方面的因素。指數結構調整的成本也來自兩個方面：交易費用和執行成本。本文僅考慮交易費用帶來的成本。由于機構投資者通常無需或部分支付交易傭金，所以分別計算僅支付印花稅（交易成本＝3‰）和部分支付交易傭金（交易成本＝5‰）兩種情況。
表6 JOYFI300指數周轉率與交易成本(參照滬深300)指數平均周轉率月超額收益
交易成本＝3‰交易成本＝5‰
月超額收益超額收益損失率月超額收益超額收益損失率最大交易成本（超額收益＝0）
JOYFI30024.663%0.397%0.375%5.54%0.361%9.07%5.40%
5 結 論
運用決策樹和Logistic回歸將基本面因素引入股價成份指數的編制，使成份股的選樣標準與定權方法更為合理客觀，同時再平衡機制使初始權重得以保持，指數的收益性質得到很大的改善。采用上述方法編制的JOYFI300獲得了顯著優于滬深300和中標300的超額收益，樣本期內JOYFI300指數組合年均收益率分別高出10.84%和9.44%。JOYFI300的風險收益特征表明采用基本面因素加權構造的指數組合是比市值加權指數組合更為有效的CAPM市場組合；基于基本面投資的理念在中國證券市場具有很強的適用性，能夠獲得超越同類型指數的風險收益水平。尤其在以滬深300為標的指數的股指期貨推出后，可為設計指數基金、ETFs、指數投資組合等指數產品提供一種可行的新方法；組合投資管理者也可利用JOYFI300優于滬深300的風險收益性質，實現投資組合的套期保值和套利交易。
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Effect of simvastatin on osteoblastic differentiation of bone marrow stromal cells in rats
【Abstract】 AIM: To study the effect on osteoblastic differentiation and proliferation of bone marrow stromal cells in vitro by administration of simvastatin in vivo and to elucidate the mechanism of the anabolic osteogenetic effect of simvastatin. METHODS: Thirty 3monthold virgin female SD rats， weighting 250-300 g were randomly pided into 3 groups: Group 1， control， 10 rats; Group 2， given simvastatin 10 mg/(kg?d)， 10 rats; Group 3， given simvastatin 20 mg/(kg?d)， 10 rats. All of the animals were given the agents through gastric tube for 28 d. At 29th day all the rats were sacrificed. Bone marrow stromal cells in femur and tibia were cultured in vitro. After treated with same condition for 14 d ALP activity of bone marrow stromal cells in supernatant was determined. The mRNA level of cbfa1 was detected by RTPCR， and cbfa1 protein expression was analyzed by Western blot. Cell count kit (CCK8) was used to examine the cell proliferation. RESULTS: After the rats were administrated with differentdose simvastatin in vivo for 28 d， and then the bone marrow stromal cells were cultured for 14 d in vitro， the level of cbfa1 mRNA was increased， and the expression of cbfa1 protein also increased in a dosedependent manner， and supernatant ALP activity increased in a dosedependent manner. Ttest showed that the proliferation of bone marrow stromal cells in Group 2 had significant difference， but no significant difference in Group 3， when compared with control group. CONCLUSION: Simvastatin leads to the high expression of cbfa1 in bone marrow stromal cells and increased ALP activity， which may be parts of the mechanisms underlying the anabolic osteogenetic effect of simvastatin.
【Keywords】 Simvastatin; bone marrow stromal cell; osteoporosis; osteoblast; cbfa1
【摘要】 目的：研究辛伐他汀體內給藥后對大鼠骨髓基質細胞在體外培養過程中成骨分化和增殖的影響，探討其刺激成骨的作用機制. 方法：30只SD雌性大鼠，隨機分為3組，每組10只. G1組（C）為對照組；G2組（SIM10）給予辛伐他汀10 mg/(kg?d)；G3組（SIM20）給予辛伐他汀20 mg/(kg?d). 連續給藥28 d后，取大鼠的骨髓細胞體外培養，誘導14 d后用RTPCR和Western blot分別檢測cbfa1 mRNA和蛋白表達的變化；收集上清液，檢測細胞堿性磷酸酶；應用cell counting kit(CCK8) 測定細胞增殖情況. 結果：辛伐他汀體內干擾28 d后，再經過骨髓細胞體外培養誘導14 d后，cbfa1因子的mRNA及蛋白表達水平均增高，呈劑量依賴關系. 上清液堿性磷酸酶表達增高，呈劑量依賴關系. 實驗組與對照組比較，G2組（10 mg）組促進細胞增殖，而G3組（20 mg組）未見顯著性差異. 結論： 辛伐他汀可促進骨髓基質細胞中cbfa1 mRNA和蛋白的表達，堿性磷酸酶活性增高，辛伐他汀刺激成骨的作用機制可能與此有關.
【關鍵詞】 辛伐他汀； 骨髓基質細胞； 骨質疏松； 成骨細胞； 核心結合因子
0引言
他汀類藥物是競爭性3羥基3甲基戊二酰輔酶A（HMGCoA）還原酶抑制劑，能夠降低肝內膽固醇的生物合成. 是近20 a來發展起來的一類新型調脂藥，目前廣泛用于治療高膽固醇血癥. 1999年Mundy等［1］經過動物實驗篩選了30 000多種天然或人工化合物后發現，他汀類藥物可引起成骨細胞系的骨形成蛋白2（BMP2）的高表達，并能有效地刺激骨形成. 繼Mundy之后，同樣的發現，通過灌胃法口服給藥（辛伐他?。?，正常及去勢大鼠［2］ 皆可見小梁骨量增加. 并伴隨成骨作用有破骨細胞數量的減少. 在臨床的回顧性研究中也發現，服用他汀類藥物可以增加血清中骨鈣素（osteocalcin，OCN）的水平［3］. 并降低股骨頸骨折的發病率［4-5］. 但具體作用機制尚不清楚，辛伐他汀對骨髓基質細胞向成骨細胞分化的作用如何，目前國內外少見報道. 本研究采用體內給藥然后體外對骨髓基質細胞培養誘導的方法，旨在觀察辛伐他汀對骨髓基質細胞（BMSc）成骨分化的影響，以探討其促進骨形成，治療骨質疏松的機制.
1材料和方法
1.1材料
1.1.1動物30只3 mo齡雌性SD大鼠（鄭州實驗動物養殖中心提供. 動物合格證號為醫動字第410117號）平均體質量250~300 g. 所有受試大鼠均置于動物房中飼養1 wk，以適應環境. 然后隨機分為3組，每組10只. G1組（C）為對照組， G2組（SIM10）給予辛伐他汀10 mg/(kg?d)， G3組（SIM20）給予辛伐他汀20 mg/(kg?d).
1.1.2材料DMEM培養基（Sigma）， β甘油磷酸鈉(Sigma)，維生素C(Sigma)，辛伐他汀（商品名：西之達，國藥準字H20000007）浙江瑞邦藥業有限公司生產，堿性磷酸酶檢測試劑盒(南京建成生物制品有限公司)， CCK8(日本協和化學研究所)，Trizol(Invitrogen)， MMLV逆轉錄試劑盒(BBI公司)， Taq DNA聚合酶(BBI公司)， 引物由北京華美生物工程公司合成.. 兔抗 cbfa1抗體，辣根酶標記的山羊抗兔Ⅱ抗，ECL發光試劑盒均購自美國SantaCruze公司.
1.2方法
1.2.1給藥方法各亞組動物分籠，標準固體飼料和自由飲水攝食喂養，光照12 h，黑暗12 h，室溫為（25±2）℃左右. 各實驗組動物于手術后次日通過灌胃給藥，對照組給予安慰劑灌胃. 連續灌胃給藥28 d后處死所有動物.
1.2.2骨髓基質細胞的體外培養無菌條件下，處死的大鼠即刻取雙后肢股骨和脛骨，將其附著肌肉和結締組織分離干凈. 用DMEM培養液（青霉素100 u/mL，鏈霉素100 μg/mL，100 mL/L胎牛血清，維生素C 50 μg/mL，β甘油磷酸鈉10 mmol/L）反復沖洗骨髓腔，收集細胞于離心管中，1000 r/min離心10 min，棄上清，細胞重懸后反復吹打成單細胞懸液，細胞計數板計數，接種于培養瓶中，50 mL/L（體積分數）二氧化碳，37℃溫箱中培養. 24 h后換液，以后，每2~3 d更換培養液，棄掉未貼壁的懸浮細胞. 至細胞融匯成致密單層后進行傳代，細胞計數后接種于培養瓶和培養板中.
1.2.3RTPCR骨髓基質細胞在體外培養誘導14 d后，采用Trizol一步法提取細胞總RNA，RNA定量后反轉錄合成第一鏈后進行PCR， PCR反應體系: 總體積25 μL，包括：10×PCR buffer 2.5 μL， 25 mmol/L MgCl2 5 μL， 2.5 mmol/L dNTP 0.5 μL， 引物(25 μmol/L)各1 μL， Taq酶0.25 μL (5 U/μL)，cDNA模板2.5μL. PCR引物的序列: Cbfa1(擴增產物為 240 bp)上游引物： 5′CCCAACTTCCTGTGCTCC3′，下游引物：5′AGTGAAACTCTTGCCTCGTC3′)；GAPDH(擴增產物為288 bp)的上游引物: 5′TGCTGAGTATGTCGTGGAG3′ ，下游引物: 5′GTCTTCTGAGTGGCAGTGAT3′. PCR反應條件：cbfa1為95℃ 5 min； 94℃ 30 s； 55℃ 45 s； 72℃ 50 s； 35個循環；72℃ 10 min. GAPDH為95℃ 4 min；94℃ 30 s；54℃ 40 s； 72℃ 35 s；30個循環；72℃ 10 min. 循環結束后取擴增產物5 μL于20 g/L的瓊脂糖凝膠電泳，電泳后再經溴化乙碇染色，最后將凝膠置于凝膠成像分析系統中掃描檢測各條帶的光密度值并求出與內參照物GAPDH的光密度比值.
1.2.4Western blot5 cm×5 cm培養瓶內細胞在經過誘導培養基誘導14 d后，細胞刮刀收集細胞. 細胞漿核蛋白抽提緩沖液［5］〔A：10 mmol/l HepesNaoH(pH 7.8)， 15 mmol/L KCl， 1 mmol/L MgCl2， 0.1 mmol/L EDTA， 1 mmol/L DTT， 1 mmol/L PMSF， 1 μg/mL Leupeptin. B: 20 mmol/L HepesNaoH(pH 7.9)， 1.5 mmol/L MgCl2， 0.42 mol/L NaCl， 0.2 mmol/l EDTA， 250 mL/L(體積分數)甘油， 0.5 mmol/L DTT，
0.5 mmol/L PMSF，
1 μg/mL Leupeptin. PMSF使用時臨時加入. 〕順序抽提提取核蛋白. 考馬斯亮藍G250蛋白定量，取相同蛋白量的樣品，以排除細胞量的差別，SDSPAGE電泳，轉膜，封閉液（50 g/L脫脂奶粉TBS+1 mL/L Tween20）封閉過夜，1∶200（體積比）稀釋的兔抗Cbfa1多克隆抗體第一次雜交，室溫溫育2 h后，TBST洗膜3次以上，每次不少于5 min. 然后辣根酶標記的羊抗兔Ⅱ抗第二次雜交，室溫溫育1.5 h即可，洗膜后ECL發光試劑盒發光，顯影，定影. 密度掃描儀定量分析.
1.2.5ALP（堿性磷酸酶） 活性的檢測細胞培養14 d后，取培養液上清，ALP檢測試劑盒檢測堿性磷酸酶活性，單位為nkat/L.
1.2.6細胞增殖的測定將消化所得細胞以2×104/mL密度接種于96孔培養板，每組50孔，每孔培養基總量為100 μL，次日起每天選擇各10孔細胞，連續測5 d，每孔加入CCK8溶液10 μL，37 ℃孵育4 h停止，在酶聯免疫檢測儀上測定每孔的光密度值（波長450 nm，參比波長655 nm），以時間為橫軸，A值為縱軸繪制細胞生長曲線.
統計學處理： 實驗數據以x±s表示，采用SPSS 10.0統計軟件包進行分析. 不同給藥劑量的實驗組與對照組進行方差分析及Dunnettt檢驗，P＜0.05，具有統計學意義.
2結果
2.1倒置相差顯微鏡下細胞形態觀測骨髓細胞接種后6~8 h，骨髓基質細胞（BMS）開始貼壁. 隨培養時間延長，未貼壁的懸浮細胞死亡或隨細胞液丟棄. 培養瓶中只有貼壁的骨髓基質細胞，骨髓基質細胞呈典型梭形或多角形的成纖維細胞. 培養約5~6 d后，細胞融匯至0.8左右.
2.2RTPCR骨髓基質細胞在辛伐他汀給藥組中cbfa1的mRNA水平較對照組升高，G3組（20 mg組）水平更高（P
2.3Western blot結果顯示辛伐他汀給藥組G2 和G3組較對照組核蛋白cbfa1表達增高，而G3組（20 mg組）表達更高(P
2.4上清液ALP活性辛伐他汀給藥組ALP活性高于對照組. G3組（20 mg組）增加更顯著(P
2.5細胞增殖與對照組比較，辛伐他汀給藥組中，G2組（10 mg組）與對照組比較有統計學差異（P0.05， 圖4).
3討論
通過本實驗我們發現辛伐他汀促進大鼠成骨細胞相關因子ALP及cbfa1基因的表達，從而促進骨髓基質細胞的成骨分化，10 mg組有促進成骨細胞增殖的作用.
骨髓基質細胞作為一種多能干細胞，在特定條件下不僅可分化為成骨細胞，還可分化為脂肪細胞，成軟骨細胞，甚至神經細胞等［7］. 而在骨組織工程學和骨質疏松治療學方面，如何能有效的刺激BMSc定向誘導分化為成骨細胞，具有重要的理論和應用價值. ALP是成骨細胞的特異表型，ALP的活性在一定程度上反映成骨細胞分化程度和功能狀態. 其活性越高，說明前成骨細胞向成熟成骨細胞分化越明顯. 宋純理等［8-9］發現在辛伐他汀對骨髓基質細胞體外培養干擾過程中，ALP活性明顯增高，BMP2高表達并呈現劑量依賴關系OCN，骨橋蛋白（osteopontin，OPN）表達水平增高，呈現劑量依賴關系. 本研究結果與其一致，提示辛伐他汀有促進骨髓基質細胞向更多成骨細胞分化的潛質，并且可能具有刺激分化成熟的成骨細胞的成骨功能.
新近研究表明，核結合因子a1 即cbfa1轉錄因子是調節成骨細胞生成的關鍵因子，屬于Runt結構域家族，因此又稱Runx2（Runt related gene 2）. Cbfa1是成骨細胞分化早期的標志物，它可調節OCN基因表達. Ducy等［10］在小鼠和大鼠骨鈣素基因啟動子區發現了與cbfa1的Runt結構域特異性結合的連接基序，即成骨細胞特異性作用元件2（OSE2）. 隨后又發現在Ⅰ型膠原（COI1）， OPN，骨結蛋白（ON）等成骨細胞標志基因中也存在這種啟動子元件，cbfa1通過調節這些基因在成骨細胞的表達，來促進成骨細胞的分化和成熟. 當非成骨細胞異位表達cbfa1時，可使這些細胞表達骨鈣素，而缺乏cbfa1基因的小鼠骨組織僅有軟骨細胞和軟骨，而無骨形成［11］. 人類常染色體顯性遺傳病鎖骨顱骨發育不良綜合癥就是由cbfa1一個等位基因突變引起［12］. OPG（osteoprotegerin）是由成骨細胞分泌的破骨細胞分化和功能的抑制因子，其在體外培養細胞中的表達也同cbfa1密切相關［13］. 本實驗中可見到辛伐他汀促進了cbfa1因子mRNA和蛋白的表達，說明辛伐他汀可通過提高cbfa1因子的表達來促進BMS分化為成骨細胞，從而使成骨細胞表達增強.
Cbfa1表達也受許多生長因子，激素以及轉錄因子的影響，Viereck等［14］報道cbfa1為成骨細胞分化成熟過程中BMP2， TGFβ和地塞米松的靶基因. 其中BMP是促進成骨細胞分化有效的細胞外因子，這類因子可通過Smads信號途徑誘導cbfa1表達，并可能通過調節cbfa1Osx和其他轉錄因子來影響成骨細胞分化［15］. 他汀類藥物進入體內后以前體藥物的形式對蛋白酶體有抑制作用，進而抑制了BMP的下游信號調節蛋白Smad的降解，使BMP的含量增加. 但其明確，具體的作用靶點和途徑機制有待進一步研究和證實.
目前已知與增殖激活有關的基因有cmyc， cfos， cjun， 與細胞周期有關的基因有組蛋白，細胞周期素基因. H4組蛋白的基因表達伴隨細胞內DNA的合成，與增殖密切相關. 本實驗中10 mg組促進細胞增殖，而20 mg組與對照組比較未見顯著性差異. 辛伐他汀對增殖作用的機制是與激活相關基因有關還是與細胞周期基因有關，是否存在雙向作用機制，即在較低劑量時促進成骨細胞增殖，而在較高劑量時抑制成骨細胞增殖尚待進一步研究證實.
目前，辛伐他汀已成為治療骨質疏松的新型藥物，對其成骨作用做了大量研究，但其臨床應用尚待進一步證實，同樣也有報道［16］，辛伐他汀可促進小鼠骨折愈合. 對骨折愈合的相關因子表達和具體作用機制未見其他報道. 因此，通過體內外實驗探討辛伐他汀對成骨作用的機制，為他汀類藥物用于臨床骨質疏松和骨折愈合治療提供依據，將更有意義.
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【關鍵詞】成本法；專利技術；價值評估
專利技術是指受到專利法保護、根據實踐經驗和科學原理發展而來的物質生產工藝方法和技能以及科學實驗方法和技能。專利技術作為一種無形資產具有經濟價值，對其價值進行科學、正確的評估，一方面能幫助專利技術所有人正確對待自己的專利權價值，又能為交易雙方提供理性、公允的價格依據，對規范專利技術交易活動、推動專利技術交易市場的健康發展起著不可估量的作用。
當專利技術具有現實或潛在的獲利能力，但不易量化的情況下，根據替代原則，可采用成本法，以該專利技術的現行重置成本為基礎評估確定其價值。
一、成本法的評估思路
成本法又稱重置成本法，是以現行市價為基礎，評估重新開發或購買類似專利技術所需要的投入成本，從而確定被評估的專利技術價值的一種評估方法。成本法的基本思路是重置原則，以重復專利技術開發過程中的投入作為重置成本，然后扣除其貶值因素來確定專利技術的價值，計算公式為：
專利技術評估價值=重置成本×成新率
二、專利技術價值評估成本法參數確定方法
根據成本法的評估思路，如何確定專利技術的重置成本和成新率，是科學確定專利技術評估價值過程中最重要的工作。
1.重置成本的確定方法
專利技術重置成本是指在現時市場條件下重新創造或購置一項全新的并與原專利技術功能相同的專利技術所耗費的全部貨幣總額。根據專利技術的來源情況，專利技術可以劃分為自創和外購兩種。不同類型的專利技術其重置成本的構成和評估方式也不相同，需要分別進行估算。
（1）自創專利技術重置成本的確定
自創專利技術的重置成本是由創制該專利技術所消耗的物化勞動和活勞動費用所構成，其確定方法一般是以自創專利技術的原始成本為基礎，乘以相應的物價指數求得。
其中，專利技術的原始成本由研制成本和交易成本構成。
①研制成本的確定。研制成本包括直接成本Di和間接成本Ii：
直接成本是指研制過程中直接投入發生的費用，包括各項活勞動和物化勞動費用，對于專利技術來說，一般包括下列項目：
D1：材料費，主要包括專利技術研制過程中各種材料、能源、動力、試劑以及輔助材料的支出；
D2：專用設備費，主要包括用于本項專利技術研究而購買并一次性計入成本的研究設備，如儀器、儀表以及專用輔助工具等費用；
D3：資料費，主要包括為本項專利技術研究而購買圖書資料、技術資料、參考文獻和復印資料等開支；
D4：外協費，主要包括在本項技術研究中，因委托、聘請其他科研服務機構從事某些研究或提供服務而發生的費用，如外加工費、制圖和數據處理費、分項技術轉包費等；
D5：咨詢費，主要包括為解決有關技術難題而發生的技術咨詢，技術鑒定等方面的費用開支；
D6：培訓費，主要包括為完成本項專利技術研究而派人外出培訓所發生的各種費用；
D7：差旅費，主要包括同本專利技術項目有關的人員因工作需要而發生的公務出差費用；
D8：管理費，主要包括在本專利技術項目的研究過程中，因組織、管理、協調科研工作而發生的一切開支，如科研管理人員的辦公費、差旅費以及管理人員的非工資性開支；
D9：折舊費，主要包括為研究本項專利技術而占用并分攤于本項目的機器、通用設備、專用設備、實驗室等固定資產的折舊費用；
D10：分攤費，主要包括用于多項技術研究而必須分攤于本項目上的科研工具等不構成固定資產的購買費用以及科研機構辦公用水電費等項支出；
D11：其他直接費用，如保險費、科研勞動保護費、物質運輸費、存儲費、專利申請手續費等。
間接成本是指與研制開發有關的費用，具體包括下列項目：
I1：高級技術人員的勞動報酬；
I2：中級技術人員的勞動報酬；
I3：初級技術人員的勞動報酬；
I4：普通工作人員的勞動報酬。
②交易成本的確定。交易成本是指發生在交易過程中的費用支出。
C1：技術服務費，指賣方為買方提供的專家指導、技術培訓、設備儀器安裝調試及市場開拓費；
C2：差旅費和管理費，指談判人員和管理人員參加洽談會和交易過程中的食宿及交通費；
C3：有關手續費，如法律咨詢、公證、審查和注冊發生的費用；
C4：交易稅金；
C5：廣告、宣傳費；
C6：其他費用。
（2）外購專利技術重置成本的評估
外購專利技術通常都有購置費用的原始記錄，評估相對容易。外購專利技術的重置成本包括購買價格和購置費用兩部分，一般采用物價指數法，以專利技術的賬面成本為依據，用物價指數進行調整，進而估算出重置成本。
2.成新率的確定
成新率是反映專利技術先進性和適用性的指標，它是由專利技術的損耗決定的。因此，確定專利技術的成新率，必須研究專利技術的損耗。
專利技術的損耗是指由于專利技術的使用、技術進步以及企業外部環境變化等原因引起的專利技術價值的降低。通?？梢苑譃閷＠夹g時效性陳舊貶值、功能性貶值和經濟性貶值三種情況。專利技術時效性貶值是由于專利技術的使用或法律的有效保護期限使得專利技術尚可使用的年限縮短而引起的；專利技術的功能性貶值是指由于技術進步，使得該專利技術所能帶來的超額利潤作用或壟斷作用減弱而引起的，一般來說，技術進步越快，專利技術更新的時間越短，其功能性貶值就越高；專利技術經濟性貶值是由于企業的外部環境變化對企業產生不利影響而引起的，如國家的政策、市場需求的減少、利率變化等。
在實際評估業務中，對專利技術貶值的確定是在考慮上述三種貶值的情況下，采用專家鑒定法和經濟壽命損耗計算法綜合得出專利技術尚可使用年限，然后與專利技術實際使用年限相比較來獲得。
三、成本法的適用范圍
在專利技術評估中，成本法是以攤銷為目的的專利技術評估方法，這種方法多用在收益額無法預測和市場無法比較情況下的技術轉讓，它的準確性較高。但是這種方法的起始點是對一種專利技術商品重置成本的估計，其方法是考察歷史成本及趨勢，并折成現值表示出來的，它沒有考慮市場需求，不考慮與專利技術相關的產品的市場及經濟效益的信息，因此缺乏對影響專利技術商品價值的市場因素及效益因素的考察。
此外，企業開發專利的目的是為了獲取壟斷利潤，不會只以研發申請成本作為交易價格，所以用成本法獲得的評估結果往往會低于專利技術的真實價值。
參考文獻
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關鍵詞：氯化聚氯乙烯聚氯乙烯氣固相光催化
Abstract: The author studied the synthesis process of chlorinated polyvinyl chloride (CPVC) initiated by UV light in a fluidized bed and explored the influences on chlorine mass content of reaction time, reaction temperature, volume fraction of chlorine gas in feedstock and UV light intensity. The optimal reaction conditions includs: the reaction time 1.5 h, reaction temperature 110 ℃, volume fraction of chlorine gas in feedstock 30%, UV light wavelength 300 nm and UV light intensity 211 μW/cm2. The chlorine mass content of the composite CPVC could reach 68.48% and the mechanical properties of the CPVC improved more noticeable in comparison with polyvinyl chloride.
Keywords: chlorinated polyvinyl chloride；pvc；gas solid phase；photocatalysis
中圖分類號：TQ 325.3文獻標識碼: B文章編號:
氯化聚氯乙烯(CPVC)是將聚氯乙烯(PVC)進一步氯化改性的產物。在氯化過程中，一般可將w(Cl)從PVC的56.7%提高到CPVC的61 %～68 %[1-2]。（PVC的w(Cl)是多少？）與PVC相比，CPVC具有更優良的物理機械性能、耐腐蝕及阻燃自熄等性能[3-4] 。目前我國用于管材、型材等硬制品的CPVC需大量進口[5]。同時，我國氯堿行業的副產品Cl2除用于生產PVC外還有剩余，而生產CPVC是消納富余Cl2的有效途徑。
目前，CPVC樹脂的生產工藝按氯化介質不同分為溶劑法、水相懸浮法和氣固相法[6-7] 。溶劑法由于使用有機溶劑、能耗較高，目前幾乎被淘汰[8]。水相懸浮法具有操作簡單、產品性能較好等優點，是目前國內外CPVC生產所采用的主要方法。但該法流程較長，產生“三廢”較多，成本相對較高[9-11]。楊金平等[12]用氣固相攪拌式氯化法生產CPVC，該法流程簡單、污染物排放小，但傳熱效果較差，不適宜大規模生產。
本研究采用紫外光引發，在流化床反應器中將PVC分子鏈中―CH2―中的H和―CHCl―鏈節中的H用Cl取代？反應式(2)中―CHCl―中H不繼續被取代？（應給出產品分子結構式，已將方程式修改）實現CPVC的制備，重點考察操作條件對CPVC中w(Cl)的影響。將流化床反應器用于PVC氯化過程，可充分利用床層內混合均勻的特點，快速移走反應熱，防止物料結塊、變色。
1 實驗部分
1.1主要試劑與儀器
PVC樹脂，SG-5，河北金?；す煞萦邢薰旧a；Cl2，石家莊市電化廠生產；硝酸銀、硫氰酸銨、硫酸鐵銨，均為分析純，市售。
氣固相流化床，自制；紫外燈，南京華強電子有限公司生產；電位滴定儀，上海精密科學儀器有限公司生產。
1.2CPVC的制備
準確稱取5.0 g的PVC粉末，裝入流化床反應器中。反應器采用金屬鍍膜加熱。料溫達到50～70 ℃ 時，通入N2防止PVC被氧化。溫度升至80 ℃ 后，開始加大N2流量使物料流化，并保持穩定。待達到氯化溫度時，打開紫外燈，并開始通Cl2，通過調節N2與Cl2流量改變原料氣中的φ(Cl2)，尾氣用堿液吸收。反應完成后，取出產品，用蒸餾水浸泡0.5 h，抽濾，重復操作至中性，然后于60 ℃真空干燥至恒重。稱量CPVC的質量，并分析產品中w(Cl)。
為了充分活化Cl2并防止紫外光能量過高時造成PVC分解，選擇了能量相對適中的波長為300 nm的紫外光作為引發光源。
1.3w(Cl)的測定
CPVC產品中的w(Cl)按GB/T 7139―2002測定。
2結果與討論
2.1反應機理
實驗采用氣固相光催化法氯化PVC，此反應為自由基反應，分為鏈引發、鏈傳遞、鏈終止三個步驟，反應機理見式（1）~式（5）。
鏈引發反應：
（1）
鏈傳遞反應：
（2）
（3）
（4）
鏈終止反應：
（5）
常見的引發方式主要有單純熱引發、紫外光引發及低溫等離子體引發。單純熱引發方式即單純依靠加熱引發氯化PVC制備CPVC，所得產品的w(Cl)較低，反應過程中物料極易發黏變黃從而影響氯化反應的進行；低溫等離子體引發氯化PVC雖然能夠得到氯化均勻且具有較高w(Cl)的CPVC產品，但是該引發方式制備CPVC較難實現工業化；采用紫外光引發方式能夠得到氯化均勻且具有較高w(Cl)的CPVC產品，若能解決工程問題，有望實現工業化，以期解決目前CPVC生產工藝中存在的環境污染、產品后處理繁瑣等弊端。（請補充CPVC的核磁譜圖或紅外譜圖，應有與PVC的譜圖對比，以表明生成了CPVC）
2.2 產品的紅外光譜分析
為了驗證實驗所得產品確為CPVC，首先對氯化后產物進行了紅外光譜分析，結果如圖1所示。從圖1中可以看出，PVC經氯化后，波數為2900cm-1和830 cm-1處的C-H振動明顯減弱，說明說明C-H鍵的數量較氯化前有所降低，同時，690cm-1處C-Cl鍵振動增強，說明聚合物中出現了更多的C-Cl鍵。由此可以證明，PVC經氯化后，確實生成了CPVC。
圖1 產品CPVC與原料PVC紅外光譜圖
Fig.1 FTIR spectra of CPVC and PVC
2.3反應條件對產品w(Cl)的影響
2.3.1反應時間的影響
在原料氣中φ(Cl2)為30%，反應溫度為110 ℃，紫外光強度為211 μW/cm2，波長為300 nm的條件下，研究反應時間與CPVC產品w(Cl)的關系。由圖2可知：反應開始CPVC的w(Cl)隨著時間的延長而增加，最高可達68.10%。當反應時間超過1.5 h后，隨著反應時間的延長，這種變化趨勢減弱，反應逐漸趨于平衡。這是因為PVC 在氯化時發生自由基取代反應，反應初始階段PVC分子鏈中含有較多的―CH2―和―CHCl―，Cl?碰撞到這兩種基團發生取代的幾率較大，所以氯化速度較快。隨著反應進行，PVC分子鏈中―CCl2―逐漸增加，而―CH2 ―、―CHCl―逐漸減少，當反應到一定程度氯取代變得比較困難，此時反應趨于平緩。因此，選擇1.5 h為PVC氯化的較佳反應時間，此時產品中w(Cl)為67.88%。
圖2反應時間與w(Cl)的關系
Fig.2 Relation between reaction time and chlorine mass content
2.3.2反應的影響
在原料氣中φ(Cl2)為30%，紫外光強度為211 μW/cm2，波長為300 nm，反應時間為1.5 h 的條件下，研究反應溫度與CPVC中w(Cl)的關系。由圖3可知： CPVC的w(Cl)隨著反應溫度的升高而增大，但達到110 ℃后這種變化趨勢減弱。120 ℃ 反應時，產品w(Cl)可達68.48%。這是因為該反應為放熱反應，溫度越高，反應阻力越大，因而反應速率減小[12]。實驗中發現，溫度過高，物料會發生粘連變黃現象，使反應無法正常進行，這是因為一定w(Cl)的CPVC在較高溫度下會發生降解脫HCl反應。因此，選擇PVC氯化的較佳反應溫度為110 ℃。
圖3 反應溫度與w(Cl)的關系
Fig.3 Relation between reaction temperature and chlorine mass content
2.3.3原料氣中φ(Cl2)的影響
在反應時間為1.5 h，紫外光強度為211 μW/cm2，波長為300 nm，反應溫度為110 ℃的條件下，研究φ(Cl2)與CPVC中w(Cl)的關系。高分子間的化學反應取決于高分子鏈上的活性基團的碰撞幾率[13]，碰撞幾率越高，分子間的反應越容易，反應速率也就越大，如果φ(Cl2)太低，使發生化學反應的有效碰撞幾率降低。由圖4看出：當φ(Cl2)在20% 以下時，改變Cl2流量對氯化產物中w(Cl)的影響顯著，但隨著φ(Cl2)進一步增大，這種影響迅速減弱，當φ(Cl2)超過30% 時，對產品w(Cl)的影響不大。因此，PVC氯化的原料氣中較佳的φ(Cl2) 為30%。
圖4 原料氣中φ(Cl2)與w(Cl)的關系
Fig.4 Relation between chlorine gas volume fraction in feedstock and chlorine mass content
2.3.4紫外光強度的影響
在反應時間為1.5 h，φ(Cl2)為30%，紫外光波長為300 nm，反應溫度為110 ℃的條件下，研究紫外光強度與CPVC中w(Cl)的關系。由圖5可知：紫外光強度為211 μW/cm2時，w(Cl)達到較高值67.88%，再提高光強度，產品中w(Cl)反而下降。這是因為CPVC分子鏈中的缺陷與PVC的相似，包括烯丙基氯、活潑氫原子和氯原子、雙鍵、含氧基團、頭頭結構及重復單元的空間排布[14]。由于聚合物鏈中的各種缺陷結構使CPVC受強光容易發生分解，首先脫去HCl，產生的HC1更進一步地促進了CPVC分子鏈中HCl的脫去，從而導致產品w(Cl)降低。
圖5 紫外光強度與w(Cl)的關系
Fig.5 Relationship between UV light intensity and chlorine mass content
2.4產品性能分析
2.4.1物理性能
國內目前還沒有CPVC產品的質量標準，各生產廠家一般采用PVC的標準檢驗其性能。因此，本研究也按GB/T 5761―2006檢驗最優條件下合成CPVC的主要物理性能（膜？粉末）。從表1看出：產品性能均能達到標準要求。
表1CPVC產品性能
Tab.1 Properties of the CPVC product
項 目 GB/T 5761―2006 CPVC性能
雜質粒子數/個 ≤30 21
揮發物(包括水)質量分數，% ≤0.40 0.30
篩余物質量分數，% (篩孔0.250 mm) ≤2.0
≥90 1.7
121
(篩孔0.063 mm)
“魚眼”數/[個?(400 cm2)-1] ≤40 35
白度（160 ℃，10 min），% ≥75 95
2.4.2力學性能
本實驗對比分析了制備的CPVC與原料PVC、工業品CPVC的力學性能。試樣制備工藝為：開煉溫度為160 ℃、開煉時間為10 min、平板硫化機壓力5 MPa、常溫冷卻，分別測定力學性能。從表2看出：PVC原料采用氣固相氯化后，各項性能均與水相法生產的工業品相近，比原料PVC有較大提高。
表2力學性能比較
Tab.2 Comparison of mechanical properties
項 目 CPVC CPVC工業品 PVC
維卡軟化溫度/℃ 125.9 120.0 80.0
拉伸強度/MPa 58.29 50.00 40.00
彎曲強度/MPa 128.15 106.00 104.00
沖擊強度/(kJ?m-2） 17.41 16.00 15.30
洛氏硬度 120 119 100
3 結論
a)在氣固流化床中以紫外光引發合成了CPVC。
b)在該反應體系中，制備CPVC的最佳工藝條件為：反應溫度110 ℃，反應時間為1.5 h，原料氣中φ(Cl2)為30%，紫外光波長為300 nm，紫外光強度為211 μW/cm2。
c)在最佳工藝條件下，得到白色CPVC的w(Cl)可達68.48%，主要性能達到GB/T 5761―2006的要求。產品力學性能相對原料PVC有較大提高。
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（西安航天動力機械廠，西安 710025）
（Xi′an Aerospace Power Machinery Factory，Xi′an 710025，China）
摘要：在固體火箭發動機金屬件焊接施工過程中，對焊接材料、焊接設備、焊接工藝規程、焊接生產現場等環節進行有效的質量控制，以保證產品的焊接質量。在本文的研究中，分析了焊接過程質量控制要點，在此基礎上，通過長安福特焊接車間的質量控制的實際案例，說明了在實際焊接過程中，通過采取合適的過程質量控制措施，可以在很大程度上提高金屬件焊接效果。
Abstract： In the welding construction process of solid rocket motor metal parts， the effective quality control of the welding material， welding equipment， welding procedure， welding production site can ensure the welding quality of the product. This paper analyzes the quality control points of welding process. On this basis， the actual cases of the quality control in the welding workshop of S-MAX show that the appropriate process quality control measure can largely improve the welding effect of the metal parts in the actual welding process.
關鍵詞 ：發動機；金屬件；焊接；質量控制
Key words： motor；metal parts；welding；quality control
中圖分類號：V463 文獻標識碼：A 文章編號：1006-4311（2015）19-0234-02
作者簡介：王文娟（1982-），女，河南滎陽人，碩士研究生，工程師，主要從事固體火箭發動機金屬件加工過程的質量控制與檢驗技術工作。
0 引言
焊接是一種永久性連接金屬材料的工藝方法。焊接過程的實質是通過加熱或加壓力等方式使金屬原子結合或者擴散，將分離的金屬材料緊密連接在一起。焊接方法在制造大型結構件或復雜機器部件時，更顯得優越。它可以化大為小、化繁瑣為簡單，通過這種方式配料，然后逐次裝配焊接拼小成大，拼簡單成復雜。這是其它工藝方法難以做到的[1，2]。
近年來，隨著我國航天事業的快速發展，型號任務逐年增加，工廠的科研生產呈現出高密度、嚴要求、快節奏的新形勢，對發動機金屬件焊接質量的要求越來越高。在發動機金屬件的制造過程中，焊接是一道比較特殊的工序，單純地采用試驗方法檢測產品的工后質量無法獲得更為全面的結果，必須通過試運行和正常使用才能發現其質量缺陷[3]。所以，一定要重點控制產品的施工質量。本文從焊接材料、焊接設備、焊接工藝規程、焊工管理、焊接生產現場、焊接試件、焊后無損檢測等幾方面對發動機金屬件焊接過程進行質量控制，以保證產品獲得較高的焊接質量。
1 焊接材料
物采部門依據焊接技術人員擬定的焊接材料采購技術條件向合格供方訂貨。從不同廠家出廠的焊條，即使型號/牌號一致，其生產工藝也有可能存在差異。所以采購時選定相對固定的焊條生產廠家，以保證焊材的一致性。收到供貨方的焊材后，首先檢查是否附帶廠家出具的質檢證書和合格證，是否明確標示了焊條的出廠批次，建議用專業技術設備復測焊材質量，確認質量達標再入庫存放。
入庫后，需要根據焊材的生產批次、型號、牌號等分類堆置。庫房室溫最低5℃，相對濕度應該在60％以內，貨架應該與墻壁、地面之間保持300mm的距離。使用焊條、焊劑之前，應先烘干并保溫，處理妥當后定額發放。為確保焊接材料的正確使用，焊工在領用焊材時必須在“焊材發放記錄”上簽字。焊材庫保管員在發放焊材時須記錄每次發放的數量，并核對焊工返回的焊條頭、焊絲頭數量與發放記錄是否一致。
2 焊接設備
焊接設備必須定期測試和檢修，并建立設備維修技術檔案，保持設備良好和可靠的使用狀態。大功率或有特殊要求的焊接設備，應采用專用電源或穩壓裝置。新啟用或大修后的設備，必須經過鑒定，試用合格后方可使用。
3 焊接工藝規程
焊接專業工藝師必須根據設計圖樣、技術條件和有關標準，編制焊接工藝規程，經批準后方能實施。焊接工藝規程中除應規定詳細的焊接工藝參數外，還應明確規定使用的設備型號、檢測器具、預熱、保溫設備及熱處理時間；焊接件和焊絲的準備、裝配和焊接質量要求；給出隨爐試樣的下料圖、編號和數量等。
焊接工藝參數應先經過工藝評定或工藝試驗，證明可行后方能納入工藝規程。焊接試驗人員按焊接工藝評定指導書進行工藝評定試板的施焊、無損檢驗、焊后熱處理，并按工藝評定指導書及有關標準的要求進行試件解剖和性能檢驗。性能檢驗合格后按施焊記錄、熱處理記錄和力學性能報告結果出具“焊接工藝評定報告”，為產品焊接工藝規程的制定提供依據。
焊接返修需要提前制定一套操作規程，明確缺陷成因及治理措施，說明應使用哪種型號/規格的焊材以及技術參數。施焊前，先將缺陷部位清理干凈，必要時可通過無損檢測確定缺陷的程度。
4 焊工管理
焊工須通過院焊接委員會組織的理論考試和技能考試，應持證上崗。在具體操作中需要嚴格遵守工藝流程，詳細填寫施焊記錄并簽字。
為了提高焊接工藝質量，焊廠應該為焊工建立檔案，定期跟蹤記錄其焊接項目、所采用的技術手段、質量檢驗方法、焊縫合格率等等，以確保所有焊接項目質量可控。
5 焊接生產現場
焊接生產現場使用的技術文件必須是現行有效的版本。焊件待焊部位的準備和裝配質量必須符合有關標準、設計圖樣和工藝規程要求。焊件、焊絲焊前必須按規定進行表面處理，并在規定的時間內進行焊接。同一工位只許擺放一種牌號的焊接材料，如有特殊要求需要一種以上的焊材時，應采取嚴格措施，防止混料和使用。有熱處理要求的焊件，必須在規定的時間內按有關文件規定進行熱處理。
焊接過程要有焊接施焊監控記錄，保證焊接質量的可追蹤性。焊接檢驗員監督焊接過程，核對操作者填寫的焊工施焊監控記錄的正確性、完整性、符合性，并蓋章確認。
6 焊接試板
產品焊接試板是焊接生產過程檢驗的一種重要手段，是對產品的主體材料包括主體焊縫的焊接材料、焊接工藝和焊工技能的綜合檢驗。
產品焊接試板必須與主體焊縫同材料同工藝并連在焊縫上和焊縫同時由同一個焊工施焊。有熱處理要求的產品，其試板必須和筒體同爐熱處理。試板分割后應按相關要求進行拉力、彎曲、沖擊及金相試驗，出具性能檢測報告。
7 焊后無損檢測
焊接完成清理干凈后需進行無損檢測來檢驗焊縫質量。無損檢驗人員應按標準規范要求取得相應資格，在接到焊接檢驗員的“無損檢驗委托單”后，按圖紙、技術條件、相應標準編制無損檢驗規程，進行無損檢驗操作，并出具無損檢驗報告。
8 長安福特馬自達焊裝車間過程質量控制實例分析
8.1 引進先進監測系統，提高焊接過程的監測效果
長安福特馬自達焊裝車間引入了德國BOS 6000系統，可以對該車型所有焊接機器人和焊點進行實時監控，既可以監控每個焊點的焊接參數、飛濺大小、焊接質量，還可以監控焊接機器人電極頭的磨損情況、打磨頻次等。
8.2 運用科學的點焊檢驗技術，更為準確地控制焊點內部缺陷
在焊接生產過程中，對樣件進行強度檢驗的環節也非常重要。點焊檢驗手段主要有非破壞性檢查（Non-Destructive）和破壞性檢查（Destructive）兩種方式，非破壞性檢查包括撬檢、超聲波檢驗等，破壞性檢查包括Teardown點焊檢查和激光焊/MIG焊金相分析等。超聲波在被檢測焊點金屬材質中傳播時，焊點內部組織的變化對超聲波的傳播會產生一定的影響，通過對超聲波受影響程度和狀況的探測，可以了解焊點性能和內部缺陷。比如：波峰逐級降低過緩（較平整），說明該焊點存在低熱溶現象，波峰逐級降低過陡（較陡峭），說明該焊點存在過熱溶現象。比如：波峰逐級降低過緩（較平整），說明該焊點存在低熱溶現象，波峰逐級降低過陡（較陡峭），說明該焊點存在過熱溶現象。
8.3 利用先進的測量技術和工具，有效控制整車尺寸
長安福特公司焊裝車間為了有效監控整車尺寸，避免后續工位出現裝配困難、匹配不良等問題。采用了先進的德國ZEISS 3D測量和瑞士Leica無線CMM 3D測量技術，對工裝夾具、分總成到總成都能做到定期監控，通過SPC的監控手段，使得每個測點都可以根據歷史測量數據在車間網站自動生成I-MR控制圖來產生預警，做到及時發現問題、提前圍堵問題、制定改進措施、輸出合格產品。
8.4 效果分析
總的來看，長安福特馬自達焊裝車間的過程質量控制，采用德國BOS 6000等先進的檢測系統，在實際焊接時，通過運用準確的焊點檢驗技術，并且有效控制車身的尺寸，不僅提高了整車CTQ（成本、時間和質量）表現，還有效確保了各車型安全、精準、穩定的產品質量。通過全公司各個車間、焊接工藝各個環節進行的質量改進，公司的整車的焊接作業質量管理工作有了明顯提升，產品和企業的競爭力都將得到有效增強。
9 結語
當前，產品質量水平已成為影響企業競爭力和經濟效益的關鍵因素，在產品質量的形成過程中，工序質量是形成產品質量最基本的環節，制造過程中質量控制的核心即是加工工序過程的質量控制。通過加強焊接材料、焊接設備、焊接工藝規程、焊工管理、焊接生產現場、焊接試板等方面的焊接過程質量控制，從而使固體火箭發動機金屬件的焊接質量得到保證。為跟上我國航天事業發展的新腳步，在今后的科研生產中必須持續提高固體火箭發動機金屬件的焊接質量，這就需要大力培養高素質的焊接人才和技術過硬的焊工隊伍，在技術上不斷進步，在工藝上不斷創新。同時還要加強有關人員的培訓和教育，提高思想素質和責任心，使質量控制落實到每道工序和每個人員。
參考文獻：
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關鍵詞： 蒼術揮發油 增殖作用 成骨樣細胞UMR－106 MTT 法
蒼術（Rhizoma atratylodes）為菊科植物南蒼術Atractylodes lancea ( Thunb.) DC.或北蒼術Atractylodes chinensis Koidz.等的干燥根莖。蒼術性辛、苦、溫，歸脾、胃、肝經，具有燥濕健脾、祛風散寒、明目作用。主治脘腹脹滿、泄瀉、水腫、風濕痹痛、風寒、感冒等［1］。
蒼術在中醫臨床中使用十分廣泛。已有研究發現蒼術揮發油增加去卵巢雌性大鼠的骨鈣含量（閆雪生《蒼術油軟膠囊的研制》。山東中醫藥大學碩士學位論文，2002），但對蒼術揮發油是否影響成骨細胞的增殖，尚未見報道。本實驗研究蒼術揮發油對成骨細胞UMR-106的增殖作用。
1 材料與方法
1.1 材料
蒼術藥材購自上海德康藥業有限公司,經中國第二軍醫大學藥學院生藥教研室黃寶康副教授鑒定為蒼術Atractylodes lancea (Thunb.) DC.的干燥根莖。
1.2 試劑
DMEM 培養基(Cibco)；3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基-四唑氫溴酸鹽MTT(Sigma)；胎牛血清FBS(杭州四季青生物工程材料研究所)；胰蛋白酶(Cibco)；其它試劑均為國產分析純。
1.3 方法
1.3.1 揮發油樣品的制備水蒸氣蒸餾法：將藥材樣品粉碎過40目篩，精確稱取200 g的蒼術，加水浸泡1 h，然后用揮發油提取器按常規水蒸氣蒸餾，提取直至揮發油的量不再增加，蒸餾液用正己烷萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥，過濾，微熱蒸去溶劑得揮發油樣品，揮發油樣品為淡黃色透明油狀物，具有刺激性氣味。取50 mg揮發油樣品溶于1 ml二甲基亞砜中，用滅菌過的0.2 mm 濾器( Gelmann Sciences) 除菌,并于4℃保存，備用。臨用時用DMEM培養液稀釋至所需濃度。
1.3.2 成骨樣細胞UMR－106的培養［3］UMR－106 (大鼠成骨肉瘤細胞系) 細胞株獲贈于江蘇鎮江醫學院病原生物教研室,源于美國麻省醫學院。將UMR-106細胞培養于10％胎牛血清（100KU/L青霉素，100 mg/ml鏈霉素）的無菌DMEM培養基中，置37℃,5%CO2培養箱中進行培養。取生長狀態良好的細胞，用0.25％胰蛋白酶消化，加含胎牛血清的培養基制成細胞懸浮液，調整細胞濃度為5×106個/ml接種于100 ml培養瓶中，二氧化碳培養箱中孵育，2～3 d換液1次。
1.3.3 MTT 法測定細胞的增殖［2］取對數生長期細胞消化計數后,用含血清的DMEM 細胞培養液將細胞濃度稀釋至1×105個/ml ,鋪入96孔細胞培養板中(100 μl/孔)培養24 h后加入含不同濃度揮發油(每個濃度6孔)的無血清DMEM培養。結束培養4 h前棄去培養液,每孔加入20 μl MTT(5 mg/ml,用PBS配制)繼續孵育4 h,有藍紫色沉淀生成,每孔加入150 μl二甲基亞砜(DMSO) ,振蕩10 min待沉淀完全溶解,用酶標儀以550 nm 為測定波長、650 nm為參比波長測定吸光值,以不加中藥的細胞孔測得的吸光值為空白,用t檢驗進行各加藥組與空白組之間均值的比較。細胞增殖率的計算如下：
增殖率（%）= Ai實驗組- Ao對照組Ao對照組×100%
Ai：不同條件下的吸光值；Ao：空白組的吸光值
2 結果
2.1 MTT 法測定細胞增殖與吸光度的關系將UMR-106細胞分別以6個不同濃度(1×105～1.2×106個)鋪入96 孔板,培養8 h貼壁后,用上述方法測定每孔吸光度(Y),與細胞數目(X)作線性回歸,得標準曲線方程：Y=0.054+0.092 6×10-6X(r=0.986 0,n=6),兩者具有良好的線性關系。見圖1。
2.2 揮發油對細胞增殖的作用用1，0.1，0.01，0.001 mg/ml 4種濃度的揮發油作用于細胞24 h，在λ＝550 nm測定其吸光值。結果見表1 。表1 不同揮發油濃度對UMR-106的增殖作用(略)
蒼術揮發油濃度0.001 mg/ml時培養24 h，可明顯促進細胞的增殖,細胞的增殖率為10.44%。在低的濃度下對細胞增殖有輕微的抑制作用,表明揮發油短期內使用低濃度較好。
為了觀察揮發油促細胞增殖的最適宜的作用時間,用濃度為0.001 mg/ml的蒼術揮發油作用于細胞分別為24，48，72 h , 在λ＝550 nm測定其吸光值。結果見表2。表2 不同作用時間對細胞增殖的影響(略)
由表2可見，當揮發油在濃度為0.001 mg/ml作用24 h時能明顯刺激UMR-106增殖，在近48 h時增殖率為20.96％， 達到最強,72 h 時細胞數目又下降。
3 討論
蒼術揮發油在0.001 mg/ml濃度下作用24，48 h，均對UMR-106增殖有明顯的促進作用。UMR-106大鼠成骨肉瘤細胞系從形態和性質上都保留了成骨細胞獨有的特征, 并且具有穩定、均一、純度高等優點。 因此,UMR-106 細胞作為一種國際公認的成骨細胞系可以用來代替成骨細胞［3］。在骨形成最初階段的成骨細胞增殖期, 成骨細胞數量增多, 形成多層細胞并合成、分泌I型膠原以便最終礦化形成骨結節。成骨樣細胞的增殖與細胞培養液中藥物的成分有關, 與成骨樣細胞UMR-106共同體外培養的方法可能作為對骨形成有促進作用的活性化合物的篩選模型, 經過進一步的動物體內實驗從這些活性藥物中追蹤對骨形成有促進作用的活性成分。因此，以成骨樣細胞UMR-106 的增殖為活性指標,觀察了蒼術揮發油對該細胞系增殖的作用。由于采用的是蒼術揮發油和細胞共同體外培養的方法,推測蒼術揮發油中含有直接刺激成骨樣細胞增殖的成分,為蒼術治療骨質疏松癥提供初步篩選，具體機制有待進一步研究。
【參考文獻】
歐體”。其源出于漢隸，骨氣勁峭，法度謹嚴，于平正中見險絕，于規矩中見飄逸，筆畫穿插，安排妥貼。楷書以《九成宮醴泉銘》等，行書以《夢奠帖》、《張翰帖》等為最著名。其他書體，也無一不佳，唐張懷瓘《書斷》中說：“詢八體盡能，筆力險勁，篆體尤精，飛白冠絕，峻于古人，猶龍蛇戰斗之象，云霧輕寵之勢，風旋雷激，操舉若神。真行之朽出于大令，別成一體，森森然若武庫矛戟，風神嚴于智水，潤色寡于虞世南。其草書迭蕩流通，視之二王，可為動色，然驚其跳駿，不避危險，傷于清雅之致?！?/p>
虞世南說他“不擇紙筆，皆能如意”。而且他還能寫一手好隸書。貞觀五年《徐州都督房彥謙碑》就是其隸書作品。他的書法，以隸書為最。究其用筆，圓兼備而勁險峭拔，“若草里驚蛇，云間電發。又如金剛怒目，力士揮拳。”其中豎彎鉤等筆畫仍是隸筆。他所寫《化度寺邑禪師舍利塔銘》，《虞恭公溫彥博碑》，《皇甫誕碑》被稱為“唐人楷書第一”。
他的楷書無論用筆，結體都有十分嚴肅的程式，最便于初學。后人所傳“歐陽結體三十六法”，就是從他的楷書歸納出來的結字規律。他的行楷書《張翰思鱸帖》體勢縱長，筆力勁健。墨跡傳世，尤為寶貴。歐陽詢的兒子歐陽通，書法一本家傳。父子均名聲著于書壇，被稱為“大小歐陽”。小歐陽《道因法師碑》，隸意更濃，然而鋒潁過露，含蓄處不及其父。
歐陽詢的書法早在隋朝就已聲名鵲起，遠揚海外。進入唐朝，更是人書俱老，爐火純青。但歐陽詢自己卻并不滿足于已經取得的成就，依然讀碑臨帖，精益求精。
有一次，歐陽詢外出游覽，在道旁見到一塊西晉書法家-索靖所寫的章草石碑，看了幾眼，覺得寫得一般。但轉念一想，索靖既然是一代書匠，那么他的書法定會有自己的特色。我何不看個水落石出。于是佇立在碑前，反覆地觀看了幾遍，才發現了其中精深絕妙之處。歐陽詢坐臥于石碑旁摸索比劃竟達三天三夜之久。歐陽詢終于領悟到索靖書法用筆的精神所在，因而書法亦更臻完美觀止。
楷書，是歐陽詢得意的作品，唐貞觀五年（公元631年）立。
